بخشی از مقاله
چکیده
ورم پستان از بیماري هاي معمول گله هاي شیري و یک پاسخ التهابی بافت پستان در تهاجم باکتري به این بافت است که منجر به خسارات اقتصادي زیادي در صنعت پرورش گاوهاي شیري می شود. استافیلوکوکوس اورئوس به عنوان یکی از مهمترین عوامل معمول ایجاد ورم پستان در گاوهاي شیري محسوب می گردد که عوامل حدت متعددي را در بافت پستان ایجاد می کند.
با توجه به گسترش روز افزون مقاومت هاي آنتی بیوتیکی در این باکتري و لزوم استفاده از داروهاي مناسب در درمان ورم پستان استاقیلوکوکی، مطالعه حاضر با هدف ردیابی مقاومت ژنتیکی به متی سیلین در سویه هاي استاف اورئوس جدا شده از 200 مورد ورم پستان بالینی و تحت بالینی در گاوداري هاي صنعتی استان چهارمحال و بختیاري به روش PCR با استفاده از زوج پرایمرهاي اختصاصی ؤن کد کننده مقاومت به این آنتی بیوتیک صورت گرفت.
از مجموع 200 نمونه شیر مورد مطالعه، 21 نمونه واجد قطعه 1250 جفت بازي ژن 23srRNA مربوط به استاف اورئوس بودند که از این تعداد 11 نمونه واجد ژن mec مربوط به مقاومت به متی سیلین بودند. به دلیل نتایج ضعیفی که از درمان ورم پستان ناشی از استافیلوکوکوس اورئوس حاصل می شود بایستی سعی شود تا برنامه هاي موفقی براي جلوگیري از انتقال عفونت از یک گاو به گاو دیگر تدوین شود. ریشه کنی بیماري امکان پذیر نمی باشد. تنها بایستی با کنترل دقیق میزان وقوع بیماري را به حداقل رسانید.
مقدمه:
بروز پاسخ سیستم دفاعی پستان که نشانه هاي کلینیکی آن ممکن است قابل مشاهده و یا غیر قابل مشاهده باشد را ورم پستان گویند. ورم پستان یکی از بیماري هاي عفونی و مهم شایع در گله ي گاوهاي شیري است که موجب کاهش 10 تا 25 درصدي شیر می شود و سالیانه زیان هاي اقتصادي بالایی را به صنعت دامپروري وارد می کند. کیفیت شیر در ورم پستان کاهش می یابد و گاوهایی که به طور مکرر آلوده می شوند اجبارا بایستی قبل از موعد مقرر حذف شوند.
امروزه به اثبات رسیده که بیماري ورم پستان به عنوان یکی از پر هزینه ترین بیماري ها در سطح گله ي گاوهاي شیري از عوامل مهم به وجود آورنده ي اختلالات تولیدمثلی نیز می باشد. استافیلوکوکوس اورئوس یکی از معمول ترین عوامل تورم پستان در گاوهاي شیري شناخته می شود - . - 4 این باکتري کوکسی گرم مثبت، بیهوازي اختیاري، غیر متحرك، فاقد هاگ، مولد آنزیم هاي کوآگولاز و DNAase می باشد. ورم پستان ناشی از استاف اورئوس غالبا به دو فرم بالینی و تحت بالینی بروز می کند. اگر عفونت در اوایل دوره شیردهی باشد به صورت بالینی - فرم حاد - و اگر در اواخر دوره شیردهی یا دوره خشک شدن باشد به صورت تحت بالینی - مزمن - تظاهر می یابد.
متی سیلین، پنی سیلین نیمه مصنوعی و نسبت به آنزیم هاي پنی سیلیناز مقاوم است. مقاومت نسبت به متی سیلین در سویه هاي مقاوم از طریق تولید یک پروتئین اختصاصی اتصالی به پنی سیلین به نام هلبBب است - که توسط ژن mecA رمزگذاري می شود - که میل ترکیبی آن در اتصال به متی سیلین کمتر از سایر پروتئین هاي متصل شونده به پنی سیلین در دیواره باکتري می باشد. در باکتري حساس - فاقد ؤن - mecA متی سیلین با میل ترکیبی بیشتري به پروتئین PBP در دیواره سلول متصل می شود که سبب لیز دیواره سلول باکتري و سرانجام مرگ آن می شود - 1
روش کار:
این مطالعه با هدف بررسی شیوع مقاومت ژنتیکی سویه هاي استاف اورئوس جدا شده از نمونه هاي شیر گاوهاي مبتلا به ورم پستان، به آنتی بیوتیک متی سیلین، در گاوداري هاي صنعتی استان چهارمحال و بختیاري انجام شد. در ابتدا با مراجعه به گاوداري هاي صنعتی، از تعداد 200 گاو مبتلا به ورم پستان بالینی و تحت بالینی نمونه برداري انجام شد. پس از ارسال نمونه ها جهت آزمایش، از روش حساس و دقیق PCR استفاده شد.
ابتدا DNA ژنومی از تمامی نمونه هاي شیر جمع آوري شده استخراج شد. براي این منظور از کیت استخراج DNA ساخت شرکت سیناژن ایران طبق دستورالعمل کیت، استفاده شد. نمونه هاي DNA پس از استخراج تا زمان انجام واکنش PCR، در فریزر -20 درجه سانتیگراد نگه داري شدند. حضور باکتري استافیلوکوکوس اورئوس با استفاده از پرایمر هاي اختصاصی ژن 23srRNA مربوط به باکتري، بررسی شد . - 4
