بخشی از پاورپوینت
اسلاید 1 :
اصول انجام و تضمین کیفیت آزمایشهای غربالگری تالاسمی
اسلاید 4 :
دستورالعمل جمع آوری نمونه خون وریدی
رعایت اصول ایمنی
استفاده از سرنگ خلاء
استفاده از دستکش برای نمونه گیر
ظروف سیفتی باکس
رعایت اصول احتیاطات استاندارد
اسلاید 5 :
مطابقت درخواست آزمایش با مشخصات مراجعه کننده
ثبت مشخصات بر روی ظرف CBC
وضعیت مطلوب حین نمونه گیری
صندلی مناسب
هنگام نمونه گیری نباید غذا ومایعات یا آدامس در دهان خود داشته باشد
از نواحی سوخته التیام یافته خونگیری نشود
از مناطقی که دچار هماتوم است نمونه گیری نشود
اسلاید 6 :
از الکل 70 جهت ضدعفونی و از مرکز به محیط انجام شود.
موضع ضد عفونی شده در معرض هوا خشک شود.
به آرامی پونکسیون انجام شود.
خون به آرامی داخل ویال CBC تخلیه شود.
پس از خونگیری بلافاصله 10 بار سرو ته شود یا روی میکسر قرار گیرد.
در صورت خونریزی موضع بیش از 5 دقیقه باید موضع را بانداژ نمائید.
اسلاید 8 :
راههای جلوگیری از هماتوم
قبل از خارج ساختن سوزن حتما بازوبند باز شود
از وریدهای سطحی اصلی خونگیری شود
بعد از خونگیری موضع را کمی فشار دهید
راههای جلوگیری از همولیز
الکل موجود در موضع با جریان هوا خشک شود
از نیدل با سایز باریک استفاده نشود
از محل هماتوم نمونه گیری نشود
نیدل به سرنگ کاملا متصل باشد
پیستون به آرامی عقب کشیده شود
مخلوط نمودن نمونه به آرامی صورت گیرد
اسلاید 9 :
ویژگیهای یک ماده ضد انعقاد خوب
عدم تغییر در اندازه گلبولهای قرمز
عدم همولیز
جلوگیری از تجمع پلاکتی
بر روی کیفیت رنگ آمیزی غیر موثر باشد
کمترین اثر را بر روی مورفولوژی گلبولها داشته باشد
دوام نمونه نسبتا زیاد باشد
اسلاید 10 :
EDTA انواع
K2 + دو مولکول آب (پودر کریستال)
حلالیت بیشتر+ کارایی برای کالیبراسیون
K3 به (شکل مایع)
ایجاد چروکیدگی + کاهش 1%HB + کاهش 2% HCT
Na2 + دو مولکول آب (پودر کریستال)
حلالیت کمتر
پایداری نمونه: 4-6ساعت در دمای اتاق
اسلاید 11 :
نسبت ضد انعقاد به خون
به ازای هر میلی لیترخونK2EDTA(mg) 0.25 ± 1.5
1.2 K3EDTA(mg)” “ “ “ “ “
غلظت بالا
چروکیدگی گلبولهای سفید + تورم و فروپاشی پلاکت ها
روی HBبی تاثیر است
چروکیدگی گلبولهای قرمز خطا در اندکس ها
غلظت پایین
ایجاد لخته و میکرو لخته و تاثیر روی پلاکت ها
K2EDTA را 6% ساخته و 50λ آن را به 2سی سی خون اضافه نمایید
اسلاید 12 :
مدارک وسوابق موجود در آزمایشگاه غربالگری تالاسمی
1-مشخصات مسئول انجام آزمایش
2-شناسنامه سل کانتر
3-روش کار با سل کانتر
4-شناسنامه اسپکتروفتومتر
5-روش کار با اسپکتروفتومتر
6-مشخصات کیت HBA2 وروش کار با آن
7- مستندات کالیبراسیون دستگاه سل کانتر
8- مستندات کالیبراسیون اسپکتروفتومتر
اسلاید 13 :
اصول کار با دستگاههای شمارشگر
بر اساس امپدانس الکتریکی
فلوسیتومتری، ترکیب قوانین اپتیک و فیزیک مایعات و استفاده از واکنش های سیتوشیمی
اسلاید 14 :
طرز کار دستگاههای شمارشگر امپدانس
دو محفظه برای شمارش وجود دارد
محفظه شمارش RBC، PLT
محفظه شمارش WBC
کووت اندازه گیری هموگلوبین به روش فتومتری
اسلاید 15 :
پس از رقیق شدن خون، محلول لیزینگ RBCها را لیز می کند.
HB تبدیل به سیانومت هموگلوبین به روش فتومتری اندازه گیری می شود.
غشاء WBCها سوراخ دار شده روی هسته چروکیده می شود.
با عبور هر سلول از روزنه یک مقاومت الکتریکی ایجاد می شود.
بر اساس حجم سلول دامنه این مقاومت تغییر می کند.
شمارش در واحد زمان ارزیابی می شود.
IMPLUS UNIT TIME
CV روش دستگاهی پایین تر از روش دستی است.
اسلاید 16 :
Impedance Principle
Constant current
Insulated chambers
Vacuum pump
Isotonic electrolytes
More on next slide
اسلاید 17 :
Impedance Principle (Cont’d)
Aperture size is 50-100µm
“Aperture size: 80 µm for commercial unit”
Measure changes in electrical resistance
Change in impedance is proportional to individual volume
Accurately counts and sizes cells
اسلاید 18 :
منابع خطا در دستگاههای شمارشگر
عبور همزمان چندین سلول از روزنه ( Coincidence error)
تاثیر یک نمونه بر نمونه دیگر (Carry- over)
WBC بیش از 50,000 (MCV، RBC بيشتر از حد معمول)
RBCها به شکل سیگاری شکل از روزنه عبور می کنند
در روش فلوسیتومتری گلوتارالدئید RBCها را فیکسه میکند
ایجاد ولتاژ بیش از حد سلولها در کنار روزنه (درصورتيكه سلول درست از وسط روزنه عبور كند ولتاِژي متناسب با حجم خود توليد مي كند.)
نقش سیستم جاروبگر وحذف اثر گردابی
اسلاید 19 :
خطاهای مربوط به اندازه گیری هموگلوبین
تاخیر تبدیل کربوکسی به سیانومت هموگلوبین
کدورت محلول درابکین
افزایش WBCبیش از 50000
افزایش لیپید و پروتئین
لیز نشدن RBC ها
اسلاید 20 :
خطاهای شمارش گلبولهای سفید
حضورnRBCها
مقاومت RBCها در محلول لیزینگ
گلبولهای تارگت در بیماریهای کبدی
گلبولهای قرمز جنینی
هموگلوبینوپاتیها به شکل هتروزیگوت یا هموزیگوت
آگلوتینینهای سرد با عیاربالا(کلامپ RBCها)
تشکیل ذرات در خون و شمارش آنها بجای WBCها
