پاورپوینت کشت ادرار

بخشی از پاورپوینت

اسلاید 1 :

بسم الله الرحمن الرحیم

کشت ادرار

اسلاید 2 :

کشت ادراربه منظور تشخيص عفونت مجاري ادراري دربيماران مبتلا به ديزوري، تكرار يا اضطرار در دفع ادرار، همچنين در موارد تب با منشا ناشناخته و يا احتمال عفونت در تجزيه ادرار ضرورت مي يابد

عوامل تداخل كننده در کشت ادرار:

آلودگي ادرار با مدفوع، ترشحات واژن، دست ها يا لباس ها، استفاده از آنتي بيوتيك ها

کلیات

اسلاید 3 :

روش نمونه گيري:

متداولترین نمونه ،ادرار وسط تمیز گرفته شده می باشد.جهت احتراز از آلودگی نحوه جمع آوری حائز اهمیت می باشد.

در مورد زنان باید آموزش لازم در خصوص تمیز کردن نواحی اطراف منفذ پیشابراه با استفاده از یک قطعه گاز تمیز آغشته با سرم فیزیولوزی استریل داده شود از هیچ گونه محلول ضدعفونی کننده ای نباید استفاده شود زیرا این محلولها می توانند به نمونه ادرار راه یافته و سبب ایجاد کشت منفی گردند

ظرف ادرار استريل را به نحو صحيح در محل مناسب قرار داده، مقداري از ابتداي ادرار را دور ريخته و 10- 5 سي سي ادرار از ادرار وسط را تهيه نمايند، درپوش ظرف را ببندند.نباید اجازه داد نمونه ادرار در بخش یا توالت به مدت طولانی باقی بماند .این موضوع باعث تکثیر ارگانیسم های موجود در ادرار گردد زیرا ادرار یک محیط مناسب برای رشد آنهاست.

هیچ نمونه ای غیر از نمونه آسپیره شده ناحیه فوق عانه از مثانه برای بررسی عفونت ادراری با عوامل بی هوازی مناسب نخواهد بود.

جمع آوری نمونه ادرار برای انجام کشت میکروبی

اسلاید 4 :

- در صورتي كه نمونه در منزل تهيه مي شود حداكثر طي 20 دقيقه پس از جمع آوري ادرار بايد آنرا در يخچال قرار داده، نمونه ادرار را مي توان تا24 -12 ساعت پس از جمع آوري در يخچال نگه داري كرد. در زمان انتقال نمونه به آزمايشگاه آن را در كنار يخ قرار دهند.

- در مورد بيماراني كه قادر به دفع ادرار نمي باشند مي توان از سوند ادراري استفاده كرد.

نمونه هاي اطفال و كودكان كم سن را در كيسه هاي يكبار مصرف به نام UriNE bAG چمع آوري مي كنند.اين كيسه ها داراي چسبي در اطراف پشت منفذ مي باشد كه به پوست پوبيك كودك مي چسبد. منفذ پيشابراه را پيش از چسباندن كيسه ها بايد تميز نمايند. حتي المقدور صبح اول وقت كيسه را به شيرخوار وصل كرده و تا ظهر ادرار جمع شده ارسال گردد.

اسلاید 5 :

1-نمونه آسپیره شده برای بیهوازی نباید به داخل لوله ویا ظرف تخلیه شود زیرا تمام عوامل بی هوازی در مواجهه با اکسیژن هوا کشته می شوند

2- نمونه هایی که در ظرف اشتباه فرستاده شده ویا برچسب اشتباه دارند

3-نمونه هایی که در ظروف نشت دار ویا ظروف مقوایی گرفته می شوند.

معیار های رد نمونه ادرار

اسلاید 6 :

نمونه ادرار نباید سانتریفوژ شود و قبل از برداشت با لوپ باید کاملاٌ یکنواخت گردد از لوپ کالیبره شده استفاده شود ، لوپ را بصورت عمودی در ظرف ادرار فرو برده وبصورت یک خط در وسط محیط کشت نهاده و سپس همانند شکل آن را پخش می نماییم . معمولاٌ از لوپ 0.001 استفاده می شود به جز در سندرم حاد یورترال خانم ها و نمونه سوپراپوبیک که لوپ 0.01  بکار می رود.

توجه :برای هر یک از محیط ها یکبار لوپ را داخل ادرار نموده وپس از انجام کشت روی شعله استریل نموده وبرای محیط دیگر مجدداٌ عمل کشت را از ابتدا انجام دهید.

نحوه انجام کشت ادرار

اسلاید 8 :

:Blood agar

این محیط بطور گسترده ای در باکتری شناسی پزشکی استفاده می شود ، علاوه بر اینکه یک محیط غنی شده است، یک محیط شاخص برای نشان دادن خواص همولیتیک باکتری هایی مثل استرپتوکوک پنومونیه و پیوژنز می باشد.و عموماٌ در پلیت مورد استفاده قرارمی گیرد.

این محیط ، با افزودن خون استریل (ترجیحاٌ خون گوسفندی) به نوترینت آگار استریل مذاب که تا 50 درجه خنک شده باشد تهیه می گردد.

غلظت خون ممکن است برای اهداف خاصی از 50-5% تغییر کند ولی معمول ترین غلظت برای کارهای روتین 10% می باشد.

محیط های کشت مورد نیاز برای کشت ادرار

اسلاید 9 :

کنترل کیفی بلاد آگار

اسلاید 10 :

Chocolate agar(Heated blood agar):

این محیط برای هموفیلوس آنفلوانزا و دیگر ارگانیسم های سخت رشد مثل نیسریا و پنوموکوک مناسب است .در هنگام تهیه این محیط در طی حرارت دادن گلبول های قرمز پاره می شوند و مواد مغذی رها می گردند .

نوترینت آگار را ذوب نموده در حرارت 75 درجه به آن خون استریل 10% اضافه نموده ، خون و آگار را با تکان دادن ملایم مخلوط کنید تا وقتی که رنگ خون قهوه ای شکلاتی شود سپس در لوله به صورت شیب دار یا در پلیت تقسیم نمایید.

اسلاید 11 :

:EMB

این محیط کشت ، محیط افتراقی – انتخابی مفیدی در جداسازی وشناسایی باکتری های روده ای گرم منفی است

رنگ های ائوزین و متیلن بلو اجزای انتخابی هستند ، در حالی که به باکتری های گرم منفی اجازه رشد می دهند، از رشد باکتری های گرم مثبت جلوگیری می کنند . قند های لاکتوز وساکاروز به محیط اضافه شده تا ایزوله را بر اساس تخمیر لاکتوز تفکیک کنند . تخمیر با تغییر رنگ و رسوب رنگ های افزوده شده در اثر افت .پی اچ مشخص و ارزیابی می شود . عمدتاٌ پاتوژن ها لاکتوز مثبت می باشند.که کلونی های آبی – سیاه با درخشندگی فلزی متمایل به سبز ایجاد می کنند (اشریشیا کلی). دیگر کلی فرم های لاکتوز مثبت مثل انتروباکتر کلونی صورتی رنگ ایجاد می کنند.کلونی های لاکنوز منفی (غیر تخمیری) شفاف بوده و کهربایی رنگ یا بی رنگ می باشند.

اسلاید 12 :

EMBکنترل کیفی

اسلاید 13 :

:MacConkey Agar

این محیط برای جداسازی باکتری های لاکتوز مثبت از لاکتوز منفی می باشد، دارای نمک های صفراوی و مقدار کمی کریستال ویوله جهت جلوگیری از رشد گرم مثبت ها است به همین جهت به آن محیطی انتخابی و افتراقی نیزمی گویند.

ساکاروز ندارد معرف محیط نوترال رد می باشد لاکتوز مثبت ها قرمز یا EMB بر خلافصورتی ولاکتوز منفی ها بیرنگ می باشند .

 محیط افتراقی – انتخابی ضعیف ومناسب برای کشت مدفوع می باشد:M.C  محیط افتراقی – انتخابی ضعیف ومناسب برای کشت ادرار می باشد:EMB

اسلاید 14 :

کنترل کیفی مک کانکی آگار

اسلاید 15 :

≤ 1000 = No Growth
≤ 10000 = Contamination10000 – 100000 = Possible infection
≥ 100000 = Probably infection

وجود 100000 یا بیشتر کلونی به ازای هر میلی لیتر از ادرار به عنوان عفونت در نظر گرفته می شود ولی در مواردی که ذکر می گردد با تعداد کلونی کمتر نیز کشت قابل بررسی است.

پیگیری کشت ادرار با توجه به تعداد کلونی

اسلاید 16 :

* درصورتیکه نمونه ادرار با سرنگ از مثانه آسپیره شده باشد تعداد کلونی هر چقدر باشد قابل ارزش بوده و می بایست آزمایش ادامه یابد.* اگر تعداد کلونی کمتر از 10000 باشد بررسی بیشتر لازم نیست جزء در مواردی که کلونی استافیلوکوکوس اورئوس باشد که در این صورت تعداد هر چقدر باشد دارای ارزش بوده وپیگیری می گردد.

* در خانم ها با فعالیت جنسی که سندرم حاد یورترال دارند وجود تعداد 100 کلونی به همراه پیوری به عنوان عفونت ادراری در نظر گرفته شده و روند کشت ادامه می یابد.

اسلاید 17 :

1-نوع میکروب را بر اساس اهمیت آن مشخص می کنیم 

2-با توجه به تعداد کلونی هر کدام از باکتری ها که دارای تعداد کلونی بیشتری بود گزارش می گردد (در صورتی که باکتری ها ازنظر اهمیت در یک رده باشند).

3-رشد سه نوع ویا بیشتر کلونی بر روی محیط کشت نشانه آلودگی است.

در صورت رشد چند نوع کلونی رعایت نکات زیر ضروری است

اسلاید 18 :

در بیماران خانم : وکلونی 100000-10000 ومیکروب گرم مثبت باشد ،اگر باسیل باشد فلور نرمال واگر کوکسی باشد Bac=mod وEp 10-8=WBC1- 4-3=باید نوع میکروب مشخص و آنتی بیوگرام گردد.

EPو 10-8=WBC 2-چنانچه 2-1=وباکتری 100000- 10000 باشد فقط شکل باکتری و ازنظر گرم مثبت یا منفی بودنگزارش می گردد.

وباکتری کمتر از 100000EP=ManyوRBCو1-0= WBC 3- چنانچه 1-0=آلودگی محسوب می شود.

ارتباط آنالیز میکروسکوپی رسوب ادرار و کشت ادرار

اسلاید 19 :

1-نوزادان وبچه ها2-مردان3-فردی که کاتتر دارد4-کسی که جدیداٌ آنتی بیوتیک مصرف نموده است 5-مصرف بالای مایعات 6-وجود پیوری 7-انسداد ادراری

در موارد زیر UTI حقیقی با کانت کمتر از 100000 دیده می شود

اسلاید 20 :

1-آنتی بیوتیک مصرف شده است 

2-باکتریهایی مانند بروسلا که محیط اختصاصی وزمان انکوباسیون بیشتری می خواهند ودر کشت دیده نمی شوند. 

3-مصرف زیاد مایعات باعث کاهش تعداد باکتری می شود.

4- افرادی که سنگ ادراری دارند تجمع باکتری پشت سنگ ها باعث سندرم حاد مجرامی شود.

مواردی که باکتری در ادرار نیست ولی گلبول سفید وجود دارد