بخشی از پاورپوینت
اسلاید 1 :
آزمايش سنجش تعداد باكتريهاي كليفرم مدفوعي و كل
1- مواد مورد نياز:
محيط كشت LTB (لوريل تريپتوز برات)
محيط كشت BGB ( برليانت گرين بيل برات)
محيط كشت EC( اشريشياكلي)
ماست ( پاستوريزه و محلي) خريداري شده ازاماكن فروش در شهرستان خرم آباد
لوله هاي مخصوص آزمايش
ساير ظروف و لوازم مورد نياز آزمايش
اسلاید 2 :
2- تهيه محيط كشت:
محيط كشت هاي مذكور طبق روش استاندارد و مطابق دستورالعمل هاي موجود در شرايط كاملاً استريل در آزمايشگاه تهيه گرديده و تا زمان انجام آزمايشات در يخچال نگهداري شدند.
3- شرايط آزمايش:
تمامي آزمايشات در كنار شعله و در شرايط استريل انجام گرديدند.
اسلاید 3 :
4- روش كار:
- بدليل غير هموژن بودن ماست هاي مورد آزمايش ابتدا ظروف نمونه برداري ماست براي مدت چند دقيقه با دست تكان داده شده و پس از يكنواخت شدن مايع حاصله از آن، توسط پي پت استريل يك ميلي ليتر از آن را برداشته و در يك بالن ژوژه استريل 100 سي سي ريخته و با آب مقطر استريل به حجم رسانيده مي شد.
اسلاید 4 :
4- روش كار:
- سپس مخلوط حاصله به هم زده شده و مقدار 10 سي سي از اين مخلوط به هر يك از ظروف حاوي محيط كشت منتقل مي گرديد.
لازم به توضيح است كه اين آزمايشات در سه مرحله انجام مي شدند كه شامل مرحله احتمالي، مرحله تاييدي(براي كليفرم هاي كل) و مرحله تاييدي براي كليفرم هاي مدفوعي بودند
اسلاید 5 :
5- آزمايش احتمالي:
اين مرحله در لوله هاي آزمايش حاوي محيط كشت LTB انجام شد.
آزمايش MPN از نوع 10 لوله اي و با حجم نمونه 100 سي سي انجام شد.
در اين مرحله 10 سي سي از مخلوط تهيه شده به هريك از لوله هاي حاوي محيط كشت در كنار شعله اضافه شدند.
اسلاید 6 :
5- آزمايش احتمالي:
سپس براي مدت حدود 24ساعت در دماي حدود 37درجه سانتي گراد در انكوباتور قرار داده شدند.
پس از گذشت مدت مذكور لوله هايي كه در لوله دورهام محتوي آنها گاز تشكيل شده بود و محيط كشت كدر گرديده بود به عنوان مثبت تلقي مي شدند.
لوله هاي منفي براي مدت 24 ساعت ديگر در شرايط فوق الذكر نگهداري مي شدند و در صورت مثبت شدن نتايج آنها ثبت مي گرديد.
اسلاید 7 :
6- آزمايش تاييدي( كليفرم هاي كل):
- در اين مرحله از لوله هاي مثبت مرحله قبل با لوپ در لوله هاي حاوي محيط كشت BGB كشت داده شده و براي مدت 24 تا 48 ساعت در دماي انكوباسيون حدود 5/44 درجه نگهداري مي شدند.
- مثبت يا منفي بودن نتايج لوله ها نيز همانند مرحله قبل بودند.
اسلاید 8 :
7- آزمايش تاييدي( كليفرم هاي مدفوعي):
- در اين مرحله از لوله هاي مثبت مرحله احتمالي، با لوپ در لوله هاي حاوي محيط كشت EC كشت داده شده و براي مدت 24 ساعت در دماي حدود 5/44 درجه در بن ماري نگهداري مي شدند.
- مثبت يا منفي بودن نتايج لوله ها نيز همانند مرحله قبل بودند.
اسلاید 9 :
8- تعيين MPN :
