بخشی از مقاله
چکیده
یکی از مشکلات اصلی در دنیا وجود بقایاي مواد منفجره در خاك و آبهاي زیر زمینی می باشد.در دهه هاي گذشته توجه ویژه اي به پالایش گیاهی، مواد منفجره شده است. عمده ماده منفجره اي که مورد استفاده قرارمی گیرد TNT می باشد که داراي آلودگی بسیار بالایی در خاك می باشد. TNT براي انسان بسیار سمی است و سبب کم خونی و هپاتیت می گردد از طرفی متعلق به گروه c مواد سرطانزا می باشد که باعث ایجاد جهش تغییر چهارچوب در انسان می گرددد. به علت مزیتهاي پالایش گیاهی استفاده از آن درحال افزایش می باشد.گیاهان ترانسژنیک گزینه بسیار خوب در فرآیند پالایش محسوب میشود، یکی از مشکلات موجود در این روش عدم شناسایی ژنهاي در گیر در مسیرتغییر شکل TNT می باشد ما ازبین غلات گیاه جودوسر - Avena sativa - ر را به علت زنده ماندن در غلظتهاي بالا اانتخاب نمودیم. در این مطالعه قصد داریم با استفاده ازآنالیز در سطح بیان ژن، اقدام به شناسایی ژنهاي درگیردر متابولیسم TNT نماییم ، آنالیز بیان ژن توسط روش - RT - Real-time PCR بر روي 10 ژن منتخب از مقالات دیگر و 1 ژن خانه دار به عنوان استاندارد داخلی صورت گرفت ودر نهایت 4 ژن ABC TP ,GST ,4CL ,NIT2 داراي افزایش بیان مناسب در پاسخ به TNT شده است.
کلمات کلیدي: پالایش زیستی ، واکنش زنجیرهاي پلیمراز کمی، جو دوسر
مقدمه
یکی از مشکلات اصلی در دنیا وجود بقایاي مواد منفجره در خاکها و آبهاي سطحی می باشد - . - 1در سالهاي اخیر پالایش زیستی توجه ویژه اي به پالایش مواد منفجره داشته است. علت این توجه ارزان بودن و نیاز به انرژي کم براي پالایش توسط گیاه می باشد - . - 2 مواد منفجره ترکیباتی با انرژي ذخیرشده فراوان می باشند که می توانند انفجار تولید نمایند و در ااثر انفجار تولید نور،گرما، فشار و صدا نمایند - . - 2,3 عمده ماده منفجره اي که مورد استفاده قرارمی گیرد TNT می باشد که داراي آلودگی بسیار بالایی در خاك می باشد.خصوصیات TNT به خاطر گروههاي نیترو متصل به حلقه آروماتیکی می باشد - TNT . - 4 براي انسان بسیار سمی می باشدو سبب کم خونی و هپاتیت می گردد از طرفی متعلق به گروه c مواد سرطانزا می باشد که باعث ایجاد جهش تغییر چهارچوب در انسان می شود - . - 5
تکنیکهاي فیزیکی استفاده شده براي از بین بردن و حذف TNT شامل سوزاندن خاك ، دفن کردن و کمپوست کردن می باشند ولی این روشها سبب صدمه زدن به ساختار خاك و از بین رفتن اکولوژي می گردند. براي دستیابی به ترمیم مطلوب، گیاه گزینه بسیار عالی می باشد، گیاه می تواند ترکیبات آلوده را به بیوماس و متابولیتهاي با سمیت کمتر تبدیل نماید.. براي انجام پالایش گیاهی نیاز به شناسایی مسیرها در گیر در پاسخ به TNT می باشد که شامل 3 مرحله تغییر شکلTNT، ترکیب با ماکرو مولکولهاي گیاهی و ذخیره کردن، می باشد - - 10 - تصویر - 1 قابلیت گیاه براي ترمیم TNT وابسته به مقاومت گیاه نسبت به این ماده می باشد ،در اکثر گیاهان سمیت TNT سبب تغییر رنگ از سبز به زرد یا قهوه اي و ممانعت از رشد می گردد.
آزمایشی براي شناسایی سطح مقاومت گیاهان خانواده غلات شامل گندم دوروم، تریتیکاله، جو، ذرت و یولاف صورت گرفت و مشخص شد که یولاف بیشترین مقاومت را نسبت به غلظت 60 میلی گرم درلیتر TNT دارد.ما در این تحقیق قصد داریم ژنهاي در گیر در مسیر پاسخ به TNT در یولاف را بوسیله q PCR شناسایی نماییم. شناسایی ژنهاي پاسخ دهنده به TNT سبب درك درستتر از مسیر بیوشیمیایی پاسخ بهTNT و در نتیجه استفاده در گیاهان ترانسژنیک حاوي ژنهاي مطلوب می گردد. تصویر شماره :1 مراحل مختلف در گیر در مسیرتجزیه TNT که شامل 3 فاز می باشد