پاورپوینت نقش موتاسیون گیرنده های سایتوکنین در رشد شاخه ها،پیری برگها،اندازه و جوانه زنی بذر،رشد ریشه و متابولیسم سایتوکنین

بخشی از پاورپوینت

اسلاید 1 :

باد میرفت به سر وقت چنار/ من به سر وقت خدا میرفتم

اسلاید 2 :

نقش موتاسیون گیرنده های سایتوکنین در رشد شاخه ها،پیری برگها،اندازه و جوانه زنی بذر،رشد ریشه و متابولیسم سایتوکنین

اسلاید 3 :

مقدمه
مااز3 گیرنده ی جهش یافته ی سایتوکنین در گیاه Arabidopsis برای انجام آزمایش استفاده کردیم.بذرهای جهش یافته، جوانه زنی سریع تر،نیاز نوری کمتربرای جوانه زنی و حساسیت به نور فروسرخ کمتری دارند.بذرهای جهش یافته سه گانه،نسبت به بذر های شاهد 2 برابر بزرگتر هستند.بررسی های ژنتیکی نشان میدهد که اندازه جنین و آندوسپرم توسط واکنش های وابسته به سایتوکنین کنترل میشود.

جهش دوبل برخی گیرنده ها مثل (ahk2,ahk3)باعث توسعه سیستم ریشه بندی قوی به خاطر رشد سریع ریشه ی اصلی و ازهمه مهم تر رشد شاخه های فرعی میباشد.محتوای افزایش یافته سایتوکنین گیرنده های جهش یافته ، یک فرمول برای کنترل سطح سایتوکنین را نشان میدهد.بررسی ها یک سری وظایف اضافی گیرنده های سایتوکنین و وظایف بارز برای AHK2 , AHK3را در کنترل کمی رشد اندام ها در گیاهان با وظایف متضاد در ریشه و شاخه ها را نشان میدهد.

اسلاید 4 :

معرفی
هورمون سایتوکنین،در برخی از فعل و انفعالات شیمیایی گیاهان نقش های مثبت یا منفی ایفا میکند.تحریک و شکل دادن به مریستم های شاخه ها،ایجاد بافت سینک،به تاخیر انداختن پیری برگ،جلوگیری از ریشه زایی و تحریک شاخه زایی،نقش داشتن در استرس های گیاهی و و جوانه زنی بذور از جمله وظایف این هورمون میباشدبرخی از نقش های سایتوکنین در درجه اول از سیکل زندگی سلول آغاز میشود.در گیاه آرابیدوپسیس،سیگنال ها ووظایف سایتوکنین به وسیله ی سه گیرنده ی ،Histidine kinases،AHK2وAHK3 وCRE1/AHK4 انجام میشود.که هرکدام ویژگی منحصر به خود را دارند.

اسلاید 5 :

CRE1/AHK4 و AHK3 ثابت شده که توانایی حس سایتوکنین به منظور تخمیر پروتوپلاست های مثلا گیاه تنباکو را تسهیل میکند.این گیرنده ها هر دو از مشتقات زآتین و ایزوپنتنیل ادنین میباشند ولی در شناسایی ترکیبات سایتوکنینی دیگر با هم تفاوت دارند. AHK2زیاد شناخته شده نیست ولی یک گزارش از درک سیگنالهای سایتوکنین گزارش شده است.mRna تمام این گیرنده ها معلوم شده که در همه اندام های گیاه وجود دارد ولی CRE1/AHK4 غالبا در ریشه تولید میشود جایی که به لایه زاینده ریشه و آوندها مربوط میشود در حالی که AHK3 بیشتر در اندام های هوای گیاه آرابیدوپسیس حضور دارد * هدف اولیه از این تحقیق ،بررسی نقش هر یک از گیرنده های مذکور و ترکیب آنها در واکنش های سایتوکنینی ازطریق 2 سنجش درطی نمو گیاه است.نقش این گیرنده ها درعمل سایتوکنین در نمودار بعدی درج شده.

اسلاید 7 :

مواد و روشها
2 سنجش مختلف در گیاه آرابیدوپسیس برای آزمایش گیرنده ها انجام شد.

شرایط رشد:
گیاهان در گلخانه و در شرایط دمای 22 درجه سانتی گراد،روز بلند(16 ساعت روشنایی و 8 ساعت تاریکی)قرار گرفت. برای سنجش نشا ها در شیشه ،بذرها به طور سطحی ضدعفونی شد و در دمای 4 درجه برای 3 روز در تاریکی تیمار سرمایی داده شد و در زیرنور سفید قرارگرفتند.نشاهای رشد کرده برای سنجش های بعدی در دمای 22 درجه در ظرفهای عمودی یا افقی در محلول شامل،3درصد ساکارز و 0.9 درصد اگاروز قرار گرفت.برای آزمایش جوانه زنی زیر نور قرمز یا تاریکی،ساکارز باید از محلول حذف شود.

اسلاید 8 :

1.سنجش جوانه زنی بذر:

به جز بذرهای موتاسیون سه گانه که مشکل رشد شاخه ها را دارندفقط آن دسته از بذرهایی که همزمان باهم و در شرایط یکسان با هم کاشته شدند، آزمایش شدند.بذرها در بستر MS )خاک مخصوص در آزمایشگاه)در دمای 4درجه سرمادهی شدند و سپس به زیرنور سفید،قرمز(660nm) قرمز تیره(724nm) یا کلا تاریکی در دمای 22 درجه سانتی گراد قرار گرفتند.سرعت جوانه زنی در زمان های مختلف اندازه گیری شد.هر آزمایش با 50 عدد بذر سه بار تکرار شد

اسلاید 9 :

2: سنجش رشد محور هیپوکوتیل:
برای این کارنشاها در ظروف عمودی در شرایط مختلف نوری،سفید،قرمز(660nm) قرمزتیره( 724nm) یا تاریکی انجام شد.با دوربین دیجیتالی (Nikon)از نشاها عکس گرفته شدو طول محور زیر لپه با استفاده از برنامه Scion image اندازه گیری شد.این آزمایشات هم با 20 عدد بذر ،سه بار تکرار شد.
یادمان باشد،کاری نکنیم که به قانون زمین بر بخورد..

اسلاید 10 :

نتایج
نتایج سنج جوانه زنی بذر:
بذرهای وحشی یا شاهد گیاه آرابیدوپسیس برای جوانه زنی به نور نیاز دارندو عمل فیتوکروم ها بایددر نظر گرفته شد.زمان جوانه زنی در گیرنده های سایتوکنین متفاوت بود.همه بذر ها در دمای 4 درجه به مدت 2 روز سرمادهی شدند.در گونه ی وحشی یا شاهد ما بعد از 24 ساعت پس از انتقال به نور سفید و دمای محیطی تعدادی بذر جوانه زدند ولی برعکس بخش زیادی از بذر های موتاسیون دارای گیرنده جوانه زدند زیرا این ویژگی در انها تحریک شده بود.24 ساعت بعداز انتقال به نور50 درصدبذرهای دارای گیرنده ahk2- ahk3 هم جوانه زدند همینطور بعد از انتقال به تاریکی 25 درصد بذرهای گیاهان شاهد جوانه زندند 42 درصدبذرهای دارای گیرنده cre1 وکمتر از 60 درصد ahk2- ahk3 و 80 درصد ahk2- cre1 در تاریکی جوانه زدند.همچنین جوانه زنی بذرها با نور فروسرخ متوقف میشود.(نمودار 1)

اسلاید 11 :

درصد جوانه زنی ها در نور های مختلف

اسلاید 12 :

رشدمحور زیر لپه در تاریکی و نور های دیگر مورد سنجش واقع شد.گونه های موتاسیون شده نسبت به گیاهان شاهد در نور سفید کمی کاهش رشد در محور زیرلپه داشتند اما هنگامی که در تاریکی رشد کردند 25 درصد رشد نشان داد. در نور قرمز نسبت به تاریکی هیپوکوتیل کوتاه تر ماند.اما کاهش رشد نسبی در گونه ی شاهد و موتاسیون ها شبیه به هم بود.به همین ترتیب هم نور فروسرخ باعث کوتاه شدن رشد هیپوکوتیل شد اما در این شرایط کاهش رشددر هر دو گونه ی تیمارشده شبیه به هم بود(نمودار 2)
نتایج رشد محور هیپوکوتیل:

اسلاید 13 :

نمودار2

A: طول هیپوکوتیل
B: طول هیپوکوتیل در نور قرمز و فروسرخ
C: کاهش رشد هیپوکوتیل

اسلاید 14 :

بحث
مایکسری از آزمایشات درباره ی جزییات نقش 3 گیرنده سایتوکنین در واکنشهای نیازمند سایتوکنین انجام دادیم.نتیجه ی کلی این بود که با وجود 3 گیرنده ای که در تمام واکنش های آنالیزشده شرکت داشتند،دیگر سیستم درک سیگنال در گیاهان و سایتوکنین،از رده خارج شده است.این سه گیرنده ی هورمون در بسیاری از واکنش ها مثل پنجه زنی ریشه ها شرکت دارند مخصوصا در گونه های موتاسیون شده که به وسیله این دو گیرنده ahk2 ahk3 انجام میشود.