بخشی از پاورپوینت
اسلاید 1 :
بسم الله الرحمن الرحیم
پروسیجرهای رایج در انگل شناسی
اسلاید 2 :
DIAGNOSIS
DIRECT
Urine Stool Sputum Biopsy Blood Aspirates
INDIRECT
IHAT LAT IFAT ELISA
MOLECULAR
PCR
اسلاید 4 :
Fecal composition
¾ water, ¼ solid
Undigested and unabsorbed food
Intestinal secretions, mucous
Bile pigments and salts
Bacteria and inorganic material
Epithelial cells, leukocytes.
اسلاید 5 :
نکاتی که باید قبل از نمونه گیری و آزمایش باید مورد توجه قرار داد
عدم استفاده از ضد اسهالی، آنتی اسیدها، بیسموت، روغن هاي معدني اختلال در تشخیص
باريم و تتراسيكلين باعث كاهش يا از بين رفتن انگل ها (مخصوصاً تروفوزوئیت تك ياخته ها) مي گردد همچنین تشکیل کریستال های دارو با تداخل در تشخیص می شود و در صورت مصرف بايد نمونه برداري بعد از گذشت 1تا 2 هفته انجام شود
اسلاید 6 :
روش های استاندارد در جمع آوری نمونه مدفوع
ظروف نمونه گیری باید تمیز، خشک و دهان گشاد باشند
درب ظروف باید محکم باشد تا رطوبت نمونه حفظ شود
ظرف نمونه باید دارای یک برچسب برای نام و نام خانوادگی، شماره بیمار، سن، جنس، تاریخ جمع آوری نمونه، اطلاعات اولیه مانند تاریخچه مسافرت به منطقه خاص باشد
حجم تقریبی نمونه مدفوع یک گردو یا 30 تا 40 گرم و برای نمونه های آبکی 30 تا 40 میلی لیتر
برای جلوگیری از آلودگی نمونه به ادرار، آب و یا مواد خارجی دیگر، توصیه می شود نمونه مدفوع مستقیما در ظرف گرفته شود
نبايد در طي يك روز، بيشتر از يك نمونه از بيمار جمع آوري نمود.
اسلاید 7 :
تعداد نمونه ها
گزارش منفی برای یکبار آزمایش مدفوع فاقد ارزش است و توصیه می شود آزمایش مدفوع سه بار با فاصله 2 تا 3 روز انجام شود.
در موارد مشکوک به آمیبیازیس، 6 بار آزمایش مدفوع( سه بار نمونه بصورت طبیعی و سه بار پس از استفاده از مسهل) احتمال مشاهده انگل را به 90 درصد افزایش می دهد.
در موارد مشکوک به ژیاردیا در صورتیکه سه بار آزمایش مدفوع منفی شد . سه نمونه بعدی توصیه می شود با فواصل یک هفته انجام شوند.
معمولا تخم انگل ها بصورت دائمی ولی بعضی از تک یاخته ها بصورت متناوب دفع می شوند.
اسلاید 8 :
تاثیر زمان در نمونه گیری
مدت زمان نگهداری و ارسال نمونه به آزمایشگاه، تاثیر زیادی در تشخیص عفونت های انگلی دارد.
نمونه های اسهالی و آبکی باید حداکثر 0/5 ساعت پس از نمونه گیری آزمایش شوند.
در صورت عدم امکان آزمایش سریع، باید محلول نگاهدارنده مانند PVA سریع تثبیت شوند.
آزمایش نمونه های غیر اسهالی را می توان تا چند ساعت به تاخیر انداخت در صورت عدم امکان آزمایش بدون نگاهدارنده می توان تا روز بعد در یخچال نگاهداری کرد.
نمونه مدفوع نباید فریز شود یا در انکوباتور گذاشته شود.
اسلاید 9 :
نگاهداری نمونه های مدفوع با مواد فیکساتیو
تأخیر در زمان انجام آزمایش بعلت بار کاری در آزمایشگاه یا فاصله حمل و نقل یا زمان رسیدن نمونه به محل
فیکساتیو باعث حفظ مورفولوژی تک یاخته و جلوگیری از ادامه نموی برخی از تخم ها و لارو های کرم می شود
با توجه به نوع نمونه و نوع آزمایش، میتوان از فیکساتیو های مختلف استفاده نمود
نسبت فیکساتیو به مدفوع بصورت 3 به 1
اسلاید 10 :
Preservation methods for fecal specimens
Preservation allows fecal samples to be examined after a delay in delivery or postage or testing.
The most common fixatives are:
Polyvinyl Alcohol, PVA
Merthiolate Iodine Formalin, MIF
Sodium acetate Acetic acid Formalin, SAF
Formalin 5%, 10%.
The preservatives used have different effect on the various stages of the parasites.
اسلاید 11 :
Advantages and disadvantages of fixatives used for the preservation of stool samples
اسلاید 12 :
Single vial system for stool specimens
اسلاید 13 :
روش های بررسی نمونه ها
روش های ماکروسکوپی: رنگ، قوام، ترکیبات و انگل های بالغ( آسکاریس، اکسیور ، بند تنیا)
روش های میکروسکوپی:
1. روش مستقیم: (Saline wet mounts و رنگ آمیزی موقت)
2. روش های تغلیظ( فلوتاسیون و سدیمنتاسیون)
3. رنگ آمیزی دائم( تری کروم- ذیل- نلسون، هماتوکسلین آهن)
اسلاید 14 :
Macroscopic Examination
Colour
Pale
Consistency
-Liquid (Troph)
-Formed (Cyst)
-Semi Formed (Cyst)
Composition
?? Blood ?? Mucus (Dysentry)
Adult Parasites
*Ascaris Worm
*E. Vermicularis
*T. Saginata
Stool Examination
اسلاید 15 :
Formed : می توان همان روز آزمایش کرد يا تا روز بعد آزمايش در یخچال نگاهداری نمود.
نکته1: نگهداري این نمونه ها در يخچال باعث حفظ مورفولوژِی تخم ها، لاروها و كيست تك ياخته مي شود
نرم Soft) ): کیست ها و احتمالا تروفوزوئیت قابل مشاهده است
شل(Loose) : بايد در فاصله زماني 60 دقيقه بعد از جمع آوري نمونه آزمايش شود.
آبكي Watery) ) : بايد در فاصله زماني 30 دقيقه بعد از جمع آوري، آزمايش شوند.
نکته 3: اولویت آزمایش با نمونه های W و دارای B و M است
Consistency
اسلاید 16 :
* نکته: تخم و لارو کرم ها در تمام اشکال دیده می شوند
اسلاید 17 :
Blood
Absent in normal faeces
Formed stool with streaks of blood: lesion in sigmoid colon, rectum or anal canal
Liquid stool with bright red blood, pus and mucus: bacillary dysentery
Semi formed stool with deep tarry black blood: melena
اسلاید 18 :
Stool Examination
اسلاید 19 :
Stool examination
Wet mount
Normal saline 0.85%
Iodine solution
Buffered methylene blue solution
Eosin solution
Stainning for permanent preparation
Heidenhain’s Haematoxilin method
Trichome stain
اسلاید 20 :
Preparing a faecal specimen
Place a drop of saline in the centre of the left half of the slide and place a drop of iodine solution in the centre of the right half of the slide.
Note: If the presence of amoebic trophozoites is suspected, warm saline (37c) should be used.