بخشی از پاورپوینت
اسلاید 2 :
مهندسی کلروپلاست
اسلاید 3 :
مقدمه
ساختار کلروپلاست
ژنوم کلروپلاست
تاريخچه مهندسی کلروپلاست
روند مهندسی کلروپلاست
کاربردها
نتايج
فهرست مطالب
اسلاید 4 :
مقدمه
فتوسنتز
اسلاید 5 :
فتوسنتز
ساختار کلروپلاست ها به گونه ای است که می توانند کار فتوسنتز را به خوبی انجام دهند
اسلاید 6 :
پلاستیدها(پلاستها )
پلاستها اندامكهایی هستند كه منحصراً در سلولهای گیاهی و بعضی از موجودات ابتدایی یافت میشوند.
پلاستهای اصلی سه نوعند:
كروموپلاستها دارای رنگیزه های رنگی میوه و گل
آمیلوپلاستها محل ذخیره نشاسته
کلروپلاستها محل انجام فتوسنتز
اسلاید 7 :
کلروپلاست
کلروپلاست حاصل اندوسیمبیوتیک بین یک سلول یوکاریوتی و یک سیانوباکتر است.
اسلاید 8 :
ساختار کلروپلاست
اسلاید 9 :
ژنوم کلروپلاست (پلاستوم)
DNA کلروپلاست یا cpDNA یاChlDNAیا pt DNA
DNA دورشته ای حلقوی
دارای طولی برابر 40 ميکرومتر
حدود 115 تا 200 کيلو باز در ساختمان DNA
دارای ژن هايی برابر 180تا 280 پلی پپتيد
اسلاید 10 :
سازماندهی ژنوم کلروپلاست در غالب اپرون
اسلاید 11 :
mRNA بصورت منو سیسترونیک رونویسی ميشود و هر ترانسژن بصورت مستقل وارد کروموزوم می شود.
خاموشی ژن سبب کاهش یا حذف بیان ترانسژن می شود.
تنظیم ژنی که میزان رونویس و تجمع پروتئینهای خارجی را تعیین می کند اکثرا بعنوان محدودیت شناخته می شود.
ژنها در غالب اپرون سازماندهی شده اند و mRNA پلی سیسترونیک رونویسی می شود و چندین ترانسژن در یک فرایند انتقال منتقل شده و بیان می شوند .
خاموشی ژن وجود ندارد .
پلی پلوئیدی سبب افزایش فراوانی رونوشت های ترانسژن شده و باعث افزایش تجمع پروتئینهای خارجی می شود .
وجود چاپرون cryو حفاظت از پروتئینها
ژنوم هسته
ژنوم کلروپلاست
اسلاید 12 :
وراثت پدری سبب آمیزشهای خارجی با محصولات و علفهای هرز می شود.
تجمع پروتئینی در سیتوزول سبب ایجاد اثرا ت پلیو تروپیک می شود.
برای تشکیل پیوند دی سولفیدی پروتئینها باید به شبکه آندوپلاسمی خشن راهنمایی شوند.
بیان ژن متغییر است.
وراثت مادری در بسیاری از گیاهان سبب جلوگیری از پراکندگی ژن بطور طبیعی می شود.
اثرات ناشی از پروتئیهای سمی به دلیل وجود ساختارهای تکه ای مجزا به حداقل می رسد.
کلرو پلاست پیوند دی سولفیدی ایجاد می کند(توسط چاپرونها که این ویزگی آنها را برای تولید واکسنهای خوراکی ایده ال می کند).
بیان ژن یکنوا خت.
وراثت کلروپلاست
وراثت هسته
اسلاید 13 :
مزايای انتقال ژن به کلروپلاست
وراثت مادری Maternal Inheritance
عدم خاموشی ژن Non gene silencing
فقدان اثر پلیوتروپیک No poliotropic Effect
فقدان اثر مکانی No position Effect
بیان بالا Hyper Expression
اسلاید 14 :
اهميت انتقال ژن به پلاستيد در تحقيقات پايه
مطالعه ی عمل ژن های موجود در خود ژنوم پلاستيد گياهان
امکان مطالعه مکانيسم های بيان ژن در کلروپلاست
مطالعه ی ژن های فرضی که هنوز وظيفه آنها به خوبی شناخته نشده
اسلاید 15 :
تاريخچه مهندسی کلروپلاست
اسلاید 16 :
مهندسی کلروپلاست
انتخاب مارکرهای ژنی
سايت ورود
توالی های اداره کننده
پايداری بيان پروتيين ها در کلروپلاست
کنترل بيان ترانسژن
حذف ژن های نشانگر انتخابی
اسلاید 17 :
انواع انتقال
بیولیستیک بمباران ذره ای با تفنگ ژنی
PEG در معرض قرار دادن کلوپلاست با DNAخالص در حضور PEG
ریز تزریقی ریز تزریق DNA به داخل کلروپلاست
ناقل اگروباکتریوم
اسلاید 18 :
طراحی وکتور (انتخاب مارکرهای ژنی)
اسلاید 19 :
انتخاب مارکرهای ژنی
اسلاید 20 :
طراحی وکتور (سايت ورود)