بخشی از مقاله
چکیده:
به منظور شناسایی قارچهای موجود در گردو غبار استان لرستان، سینیهای مدورنمونه برداری را در پنج شهرستان مختلف شامل کوهدشت، خرمآباد، ازنا، بروجرد و پلدختر طی روزهای بارش خاک در مکانهای مورد نظر قرار دادیم و نمونهگیری طی هشت زمان مختلف به فاصله یک ماه ازهمدیگر صورت گرفت. سپس از نمونههای به دست آمده سوسپانسیون خاک تهیه شد و سوسپانسیون حاصل را روی محیط کشت PDA حاوی /323میلیگرم در لیترسولفات استرپتومایسینT به منظور جداسازی قارچها کشت داده شدند . و هر کدام ازقارچهاپس از جداسازی خالص و شناسایی شدند.
مقدمه:
بررسیهای محققان نشان میدهد که منشاءطوفانهای گرد و غباری مناطق خشک و نیمه خشک به ویژه ساهارا خاورمیانه، جنوب شرقی آسیا و مغولستان است. همچنین مناطق شمال غربی آمریکا و استرالیا به عنوان منابع دیگر گرد و غبار شناخته شدهاند
بررسیهای مربوط به فراوانی روزهای گرد و غباری ایران نشان میدهد که چالههای مرکزی ایران بیشترین روزهای گرد و غباری را دارند . - Annon, 2009a - منابع اصلی گرد و غباری ورودی به غرب ایران از جمله استانهای لرستان، ایلام، خوزستان و بوشهر نواحی بیابانی نسبتا نزدیک به این منطقه مثل صحرایسوریه، عراق و صحرای موجود در شمال شبه جزیره عربستان است
گرد وغبار به عنوان حمل کننده قارچهای توکسینزا می باشد. . - 2 +DUD et al., 2000 - طوفانهای گرد وغبار اثرات منفی دربخشهای مختلف کشاورزی دارد
غبار اتمسفری مانع از نفوذ نور خورشید شدهو میتواند منجر به کاهش تولیدات کشاورزی به میزان 5-30 درصد گردد
در زمان ایجاد طوفانهای گرد و غباری، مواد مغذی و مواد آلی خاک از بین رفته که باعث پایین آمدن بهرهوری کشاورزی میگردد . - Xuanet al., 2004 - علاوه بر این میزان خسارت گرد و غبار بر محصولات جالیزی، ذرت و گندم در ایران بین 15 تا 20 درصد پیش بینی گردیده است. . - Annon, 2009b - در تحقیقی نشان داده شد از 2 پدیده گرد و غبار در فلسطین اشغالی جمعیت قارچهای غالب عبارت بودند از Aspergillusniger، A. fumigatus، A. tami، Alternaria alternate، Penicillium spp. و Coleterodiumsppکه بیشتر قارچهای شناخته شده . . - Schlesinger et al., 2006 - در مطالعهای که در جزایر ویرجینیا بر روی میکروارگانیسمهای موجود در گرد و غبار انجام گرفت
نتایج نشان داد که از میکروارگانیسمهای جدا شده %25 برای گیاهان بیماریزا و %10 برای انسان جزء بیماریزاهایی فرصت طلب بودند . - Griffin et al., 2001 - قارچهای بازیدیومیستبیشترین درصد را در گردوغبار هوا دارند و پس از آن آسکومیستها در حدود 30-40 درصد ازقارچهای موجود در گردو غبار هوا را تشکیل می دهند . - Grifinet al., 2005 - گونه های فوزاریوم بعنوان عوامل لکه برگی , سوختگی قسمتهای هوایی وپوسیدگی ریشه ,گونه های ریزوپوس بعنوان عوامل پوسیدگی نرم میوه وسبزیهای پس از برداشت محصول ,گونه های ریزوکتونیا عامل پوسیدگی های طوقه ,استولون,ریزوم شناسایی شده اند
لذا با توجه به اهمیت قارچها ی موجود در گرد وغبار و نقش آنها در بیماریزایی برای گیاهان این بررسی برای جداسازی و شناسایی قارچهای مرتبط با گرد و غبار سالهای اخیر در مناطق مختلف استان لرستان انجام گرفت و نقش بیماریزایی آنها در گیاهان نیاز به مطالعه و بررسی بیشتر دارد.
مواد و روشها:
نمونهبرداری و جداسازی جدایهها: برای نمونه برداری به منظور جداسازی و شناسایی قارچها از هر شهرستان بطور تصادفی یک منطقه را برای نمونه برداری انتخاب و 4 عدد سینی نمونه برداری را در آن منطقه با فاصله از همدیگر قرار دادیم و نمونه برداری طی 8 ماه و به فاصله یک ماه از همدیگر صورت گرفت. سپس در آزمایشگاه جهت استخراج قارچها از نمونهها از روش ترقیق - serial dilution - استفاده شد - برای شاهد از آب مقطر سترون به جای سوسپانسیون استفاده شد - . هر گرم خاک با مقدار 9 میلیلیترآب مقطر استریل مخلوط شد چندین بار - 6 بار - عمل رقیق سازی صورت گرفت. پس از تهیه این سوسپانسیون از فاز رویی آن 1 میلیلیتر برداشته و در 9 میلیلیتر آب مقطر استریل ریخته شد و از محلول دوم نیز یک میلیلیتر برداشته و به 9 میلیلیتر آب مقطر سترون ریخته شد و به همین ترتیب عمل رقیق سازی انجام شد تا رقت آن به 10-6 برسد.
در هنگام عمل رقیق سازی از پیپتهای سترون استفاده شد. سپس به منظور جداسازی قارچها 1 میلیلیتر از محلول را برداشته و آرام آرام در سطح محیط کشت PDA حاوی 0/03آنتیبیوتیک سولفات استرپتومایسین پخش گردیدند و پس از 2 - 3 روز نگهداری در انکوباتور در دمای 25 درجه سانتیگراد نسبت به جدا سازی وتجدیدکشت - sub culture - قارچها اقدام شد. خالصسازی و شناسایی جدایهها: قارچها با استفاده از روش تک اسپور کردن روی محیط آب آگار - WA - خالص سازی شدند و در نهایت با استفاده از کلیدهای شناسایی قارچها شناسایی شدند
جنس مختلف قارچ از گرد و غبار هوا جدا سازی و شناسایی گردید . تجزیه و تحلیل دادهها: آزمایشات درقالب طرح بلوکهای کاملا تصادفی با 5تکرارانجام گرفت. سوسپانسیون خاک ازنمونه خاک جمع آوری شده درسینیهای نمونهبرداری تهیه شد - برای شاهد از آب مقطر سترون به جای سوسپانسیون استفاده شد - . تجزیه و تحلیل دادهها با استفاده از نرم افزار Excel version 2010 انجام گرفت.
