بخشی از پاورپوینت
اسلاید 1 :
بسم الله الرحمن الرحيم
اسلاید 2 :
Hemoglobin A2
اسلاید 3 :
هموگلوبين A2 داراي دو زنجيره آلفا ودو زنجيره دلتا مي باشد .
زنجيره دلتا شبيه بتا بوده وتنها در 10 اسيد آمينه تفاوت دارد . α2δ2
سنتز زنجيره دلتا از اواخر دوران جنيني شروع شده وبتدريج در در سال اول زندگي بالا مي رود و به مقدار بالغين بين 3/5-1/5 درصد مي رسد .
افزايش A2تقريبا محدود به سندرم هاي تالاسمي بتا مي باشد ودر اين موارد بندرت بيش از 7-6درصد مي شود .هرگز از 12-10درصد افزايش نخواهد داشت .
اسلاید 5 :
افزايش A2در پركاري تيروئيد ”كم خوني مگالوبلاستيك كم خوني داسي شكل ديده شده است .در اين موارد سطح افزايش آن كمتر از 4/5 درصد است .
سطح HbA2در آنمي فقر آهن وسندرم هاي تالاسمي آلفا كاهش مي يابد .
گاهي در كودكان مبتلا به تالاسمي ماينور بتا HbFديرتر به كاهش سطح نرمال رسيده و HbA2هم ديرتر به افزايش خود براي تشخيص تالاسمي ماينور بتا مي رسد .
روش برتر اندازه گيري HbA2 روش HPLCاست .
اسلاید 6 :
در كمبود خفيف آهن ميزان HbA2در تالاسمي ماينور بتا در حد3/7 -3/4 ودر كمبود شديد آهن در محدوده نرمال
3/3-1/5 قرار مي گيرد .
دراين مورد ابتدا بايد درما ن آنمي فقر آهن انجام شده تا سطح هموگلوبين كل به حد طبيعي برسد .سپس اندازه گيري مجدد HbA2صورت گيرد .
اسلاید 7 :
در موارد زير با وجود اندكس هاي طبيعي مقدار HbA2بالاست :
همراهي تالاسمي ماينور بتا با تالاسمي آلفا ( تالاسمي α+β )
بيماريهاي كبدي واحتساب كلسترول در غشاي RBC
در هيپرتيروئيديسم وكم خوني مگالوبلاستيك در اثر كمبود اسيد فوليك و B12
هتروزيگوت داسي شكل وهموگلوبين هاي ناپايدار .
اسلاید 8 :
چند نكته مهم
ازدواج يك طرف داراي تالاسمي ماينور بتا +
طرف ديگر با HbA2 واندكسهاي لب مرز
امكان تولد نوزادي مبتلا به تالاسمي اينترمديا وجود دارد چون مقادير لب مرز گاهي بيانگر جهش هاي خفيف ژن بتاست .
افزايش شديد HbA2 باروش كروماتوگرافي ستوني ممكن است بيانگر وجود ديگر موارد غير طبيعي مانند S,D,G باشد .
اسلاید 9 :
چند نكته مهم
يك طرف تالاسمي ماينور آلفا+
طرف ديگر داراي CBC,A2نرمال
در اين حالت هر چند منعي براي ازدواج وجود ندارد اما طرف نرمال ممكن است حامل خاموش تالاسمي آلفا با كمبود ِيك ژن آلفا (-α/αα )باشد ودر طرف ديگر بصورت αα/--)) باشد .در اين حالت امكان تولد نوزادي با هموگلوبين H وجود دارد .
اسلاید 10 :
چند نكته مهم
افزايش شديد HbA2 باروش كروماتوگرافي ستوني ممكن است بيانگر وجود ديگر موارد غير طبيعي مانند S,D,G باشد .
افزايش بيش از 3/5درصدي HbA2همراه با CBC نرمال بايد جدي قلمداد شود وبررسي بيشتري بعمل آيد .
افزايش لب مرز HbA2ممكن است بيانگر جهش هاي خفيف ژن بتا باشد .
اسلاید 11 :
يكي از تست هاي تشخيصي مهم جهت تأئيد وجود بتا تالاسمي
مينور تعيين درصد هموگلوبينA2 مي باشد .
روشها ي سنجش
كروماتوگرافي تعويض يوني ستون ميكرو كروماتوگرافي تعويض يوني كاتيوني .
HPLC .
الكتروفورز استات سلولز .
اسلاید 12 :
Hemoglobin A2
كروماتوگرافي تعويض يوني ستون مايع Micro column از انواع كروماتوگرافي هاي مايع – جامد بوده كه بر اساس واكنش متقابل گروههاي باردار مولكول هموگلوبين و رزين ، جداسازي صورت مي گيرد. بر روي رزين يونهايي وجود دارد كه قابل تعويض با يونهاي همبار خود در هموليزات مي باشند.
در اين روش از رزين آنيونيك دي اتيل امينواتيل سلولز DEAE52 استفاده می شود .
اسلاید 14 :
رزين انيونيك DE52 تمايل به گرفتن بار منفي دارد.
PH بافر و رزين از نقطه ايزوالكتريك هموگلوبين A2 پايين تر است .
هموگلوبين A2 مثبت شده و بصورت يك حلقه از ستون خارج مي گردد
اسلاید 17 :
Calculation
% Hb A2 = (Abs HbA2 / Abs Hb total) X 25
اسلاید 18 :
اساس روش
تورم رزين با بافر و به تعادل رسيدن آن با بافر تاPHرزين به PH بافر برسد .
- اضافه نمودن هموليزات به ستون .
- جداسازي انتخابي اجزاي نمونه بوسيله تغييرPH قدرت يونيك بافر.
در اندازه گيري هموگلوبين A2 به روش كروماتوگرافي ستوني مي توان از بافر گلایسين يا بافر تريس استفاده نمود .
اسلاید 19 :
بهتر است از نمونه كنترل تجاري در هر سری كاري استفاده شود در صورت عدم دسترسي، يك نمونه که هموگلوبين A2آن مشخص شده است به عنوان نمونه كنترل گذاشته شود.
در صورت استفاده از نمونه كنترل و خواندن نتايج در محدوده مورد انتظار ،نيازي به انجام نمونه هاي بيماران
بطور دوتايي نمي باشد.
اسلاید 20 :
این متد برای اندازه گیری هموگلوبین A2 اختصاصی نیست بطوری که بسیاری از هموگلوبین های همبار با هموگلوبین A2نیز از ستون خارج می شوندکه شامل هموگلوبین C,E,O arab و بعضی از واریانت های هموگلوبین A2 (A'2)و زنجیره دلتا میباشند. لذا هموگلوبین A2از این هموگلوبین ها قابل تفکیک نیست.
