بخشی از مقاله
بررسي اثر آنتي بيوتيک تتراسيکلين بر روي خصلت ضد باکتريايي نانوالياف کيتوسان
چکيده
نانو الياف با سايز ميانگين ١٥٠-٥٠ نانومتر بوسيله الکتروريس محلول پليمري کيتوسان . پلي ( اتيلن اکسيد) و تريتون ١٠٠-x
ساخته شدند. تصاوير ميکروسکوپ الکترون پويشي نشاندادند که اين محلول الياف قابل قبولي توليد کرد، که از نظر قطر ذرات و يکنواختي و شبکه اي شدن مناسب مي باش .از تست هاي ميکروبي انجام شده مشخص گرديد که اين نانوالياف داراي خصلت ضد ميکروبي بوده و مي توانند باکتري هاي اشريشيا کلي و سودوموناس آئروژينوس را از بين ببرند. لذا با توجه به سايز کم و مساحت سطح بالا، اين نانو الياف مي توانند در پوشش دهي زخم هاي سطحي استفاده گردند. همچنين با بررسي نتايج حاصل از افزايش تتراسايکلين به محلول پليمرها، تصاوير ميکروسکوپ الکترون پويشي و نيز نتايج تست هاي ميکروبيولوژيکي مشخص گرديد که اين آنتي بيوتيک تاثيري در خصلت ضد باکتريايي کيتوسان نداشته است .
واژه هاي کليدي: نانوالياف، کيتوسان، آنتي بيوتيک، تتراسايکلين ، ميکروسکوپ الکتروني پويشي .
مقدمه
بررسي هاي دقيق اثبات کرده است که کيتوسان ازنظربيولوژيکي : تجديدپذير، زيست تخريب پذير، غيرپادتني و زيست سازگار بوده [ ١] و به علت داشتن خصلت ضد باکتريايي ، داراي کاربرد گسترده اي در پوشش زخم و جراحت ، بهبود زخم ، سيستمهاي رهاسازي دارو و کاربردهاي متنوع در مهندسي بافت [٢] مي باشد. نانو الياف کيتوسان مي توانند با استفاده از محلول مايي کيتوسان، الکتروريس شوند. تنها کيتوسان با وزن مولکولي g.mol ١٠٦٠٠٠ مي تواند نانو الياف يکنواخت (بدون گره) را بوجود آورد. در حاليکه از کيتوسان هاي با وزن مولکولي بالاتر يا پائين تر نانو الياف مناسبي تهيه نگرديده اند. در گزارش جديدتري از پلي (اتيلن اکسيد). کيتو سان براي ساخت نانوالياف هيبريدي بي نهايت ريز استفاده شده است که نشان مي دهد قابليت ريسندگي محلول هاي کيتوسان 1 قوياً به نسبت جرم کيتو سان به پلي (اتيلن اکسيد) بستگي دارد[ ٤-٣]. در اين بررسي ، نانو الياف با نسبت جرمي مناسب از کيتوسان به پلي (اتيلن اکسيد) و غلظت هاي پليمري مختلف ساخته شدند. در اين کار، پلي (اتيلن اکسيد) براي کاهش ويسکوزيته محلول کيتوسان استفاده شد. به منظور بررسي اثر افزودني آنتي بيوتيک بر روي خصلت ضد باکتريايي کيتوسان، از آنتي بيوتيک تتراسيکلين استفاده گرديد.
بخش تجربي
دستگاه وري و مواد شيميايي
کيتوسان (وزن مولکولي متوسط ) و پلي اتيلن اکسيد (متوسط وزن مولکولي ٩٠٠٠٠٠) از شرکت سيگما- آلدريچ و تريتون ايکس -١٠٠ از شرکت فلوکا و آنتي بيوتيک تتراسيکلين از شرکت داروسازي ايران ناژو خريداري شدند. همچنين از دستگاه ميکروسکوپ الکتروني پويشي مدل لئوساخت انگلستان براي گرفتن تصاوير و دستگاه الکترواسپينينگ پرتابل ساخت ايران حهت ساخت نانوالياف استفاده گرديد.
تهيه محلول کيتوسان (٢%) و پلي اتيلن اکسيد (٣%)
براي تهيه محلول پليمري ٢ درصد وزني . حجمي کيتوسان، ٠.٥ گرم کيتوسان با محلول اسيد استيک ٠.٥ مولار به حجم ٢٥ ميلي ليتر رسانده و به مدت ٢٤ ساعت بهم زده شد. در مورد محلول پلي اتيلن اکسيد هم به همين ترتيب عمل شد و ٠.٧٥ گرم از پودر جامد پلي اتيلن اکسيد با محلول اسيد استيک ٠.٥ مولار به حجم ٢٥ ميلي ليتر رسانده شد.
جهت توليد الياف مناسب از کيتوسان به پلي اتيلن اکسيد، نسبت ٩ به ١ از محلولهاي پليمري کيتوسان ٢% و پلي اتيلن اکسيد ٣% و ٠.٣% افزودني تريتون ايکس -١٠٠ استفاده شد.
الکتروريسندگي
از محلول پليمري در مدت زمان (١٥-١٠ دقيقه ) و در فاصله بهينه (٢٠-١٥ سانتي متري) و با ولتاژ بهينه (٢٠ کيلو ولت ) الياف پليمري تهيه شد.
آناليز ميکروبيولوژيکي
ابتدا سه نمونه الياف با نسبت ٩٠ به ١٠ از کيتوسان به پلي اتيلن اکسيد با ماندگاري بيش از ٤ ماه (نمونه ١)،٩٠ به ١٠ کيتوسان به پلي اتيلن اکسيد تازه تهيه شده (نمونه ٢) و ٩٠ به ١٠ کيتوسان به پلي اتيلن اکسيد به اضافه ٠.٣% تتراسايکلين با ماندگاري يک هفته (نمونه ٣) براي آناليز ميکروبي (بررسي اثرات آنتي باکتريال ) تهيه گرديد.
از سه باکتري E. Coli،P.Aeruginosa و S.Aureus نيم مک فارلند تهيه شد و به مدت ٣ ساعت با پليمرهاي فوق تماس داده شدند. پس از کشت ، به مدت ٧٢ ساعت در دماي ٣٧ درجه سانتيگراد تحت عمل انکوباسيون قرارگرفتند.
