بخشی از مقاله
چکیده
موارد ارجاعی شامل یک قلاده سگ ماده نژاد مخلوط 5 ماهه و یک قلاده سگ نر سیبرین هاسکی 14 ماهه به کلینیک دانشکده ی دامپزشکی کرمان بودند که ضایعات متعدد جلدی مخاطی اروزیو بر روی تیغه ی بینی؛ پلک چشم و لب بالای حیوان داشتند. نمونه های تخریش پوستی و لام فشاری از محل ضایعات بر روی تیغه بینی و پلک چشم حیوانات تهیه شده و در زیر میکروسکوپ بعد رنگ آمیزی گیمسا تعداد زیادی amastigote در هر دو نمونه مشاهده گردید.
در رادیوگرافی و آزمایشات هماتولوژی و بیوشیمیایی و معاینات بالینی هیچ یافته غیر طبیعی وجود نداشت. نمونه های تکمیلی از پوست، مغز استخوان و غده لنفاوی پاپلتیال برداشت و جهت استخراج DNA یه آزمایشگاه مرکز نشخیص لیشمانیوز ارسال شد. در مورد هر دو نمونه در PCR اختصاصی گونه ای نمونه ی پوست آلودگی به گونه ی لیشمانیا تروپیکا را نشان داد. اما نمونه های مغز استخوان و غده لنفاوی در بررسی سیتولوژی و از نظر PCR منفی بودند.مخزن اصلی لیشمانیا تروپیکا انسان و جوندگان میباشند و ابتلا در سگ ها به صورت کاملا اتفاقی است.
توصیف بالینی
تاکنون گزارش هایی از جداسازی L.tropica از ضایعات منتشر جلدی احشایی و ضایعات احشایی متعاقب آلودگی به L.infantum در سگ ها در کشور ایران انجام پذیرفته است - . - 2 اما این گزارش به وقوع شکل جلدی L.tropica در سگ ها می پردازد.
موارد ارجاعی شامل یک قلاده سگ ماده نژاد مخلوط 5 ماهه و یک قلاده سگ نر سیبرین هاسکی 14 ماهه به کلینیک دانشکده ی دامپزشکی کرمان بودند که ضایعات متعدد جلدی مخاطی اروزیو بر روی تیغه ی بینی؛ پلک چشم و لب بالای حیوان داشتند. نمونه های تخریش پوستی و لام فشاری از محل ضایعات بر روی تیغه بینی و پلک چشم حیوانات تهیه شده و در زیر میکروسکوپ بعد رنگ آمیزی گیمسا تعداد زیادی amastigote در هر دو نمونه مشاهده گردید.
هم چنین بیوپسی مغز استخوان جهت بررسی وضعیت آلودگی از ناحیه پروکسیمال استخوان بازو صورت پذیرفت. برای تهیه نمونه مغز استخوان، تحت آرام بخشی شیمیایی با کتامین %10 وآسپرومازین %1 ناحیه مورد نظر موچینی و اسکراب جراحی شد و پس از ایجاد شکاف بر روی پوست و عضلات، با استفاده از نیدل جمشیدی به میزان 2 سی سی نمونه مغز استخوان استحصال شد. برداشت جراحی غده لنفاوی پاپلتیال نیز جهت تهیه گسترش فشاری و استخراج DNA صورت پذیرفت. اسمیرهای تهیه شده ، به روش گیمسا رنگ امیزی گردید تا با میکروسکوپ نوری بررسی شود.
استخراج DNA با استفاده از کیت تجاری - Gene All Biotechnology - کره جنوبی انجام پذیرفت .بدین منظور ابتدا طبق دستور شرکت سازنده، 15 میکرو لیتر پروتئیناز K به میکروتیوب های 1.5 میلی لیتری اضافه و سپس 200 میکرولیتر نمونه مغز استخوان و یک گرم غده لنفاوی و 200 میکرولیتر بافر BL به هر میکروتیوب اضافه شد. میکروتیوب ها ورتکس شده و به مدت نیم ساعت در دمای 56 درجه سانتی گراد در بن ماری نگهداری شد. سپس سانتریفیوژ با دور سریع انجام داده تا قطره های متصل شده به دیواره میکروتیوب جدا شوند.