بخشی از مقاله
چکیده
به منظور بررسی تاثیر سالیسیلیک اسید و کلسیم بر مقاومت به سرمازدگی دانهالهای پسته رقم کله قوچی، یک آزمایش فاکتوریل در قالب طرح کاملا تصادفی با سه تکرار در گلخانه انجام شد. تیمارها شامل سالیسیلیک اسید - صفر، 0,75 و 1,5 میلی مولار - ، کلسیم - صفر، 3 و 6 در هزار - و دما - صفر، -2 و - -4 بودند.
نتایج نشان داد که با کاهش دما به -2 و -4 درجه سلسیوس، درصد نشت یونی برگ دانهال های تیمار شاهد به ترتیب با افزایش 6 و 52 درصدی مواجه شدند. همچنین کاهش دما از صفر به -4 درجه سلسیوس، سبب افزایش غلظت پرولین و ترکیبات فنل برگ دانهالها شد. بنابراین به نظر میرسد مصرف توامان بالاترین غلضت های اعمال شده سالسیسیلیک اسید و کلسیم موجب کاهش درصد نشت یونی، افزایش درصد پرولین و ترکیبات فنلی برگ دانهالهای پسته نسبت به تیمار شاهد شد.
مقدمه
پسته - Pistacia vera L. - یکی از گونههای مهم جنس Pistacia است. طبق بررسیهای انجام شده بیش از 477 هزار هکتار باغ پستهی بارور و غیر بارور در ایران وجود دارد. یکی از علل کاهش تولید محصول سالانهی باغهای پسته وجود سرمازدگی بهاره میباشد. بطوریکه این تنش هر ساله خساراتی به باغداران پسته وارد میکند. یکی از مهمترین اثرات سرما، تاثیر آن بر ساختار غشائ سلولی، نفوذپذیری غشا و افزایش خروج یونها از سلول میباشد. نشت یونها از دیواره سلول مربوط به فعالیت انزیمهای تجزیه کننده دیواره سلولی است که اثر سرما سبب افزایش میزان فعالیت این آنزیم ها میگردد. در گیاهان حساس به سرما به علت نفوذ پذیری بالای غشای سلولی میزان نشت یونها و هدایت الکتریکی بالاست
سالیسیلیک اسید یک فنل گیاهی است که دارای یک حلقه آروماتیک همراه با یک گروه هیدروکسیل یا مشتقات فعال آن میباشند. این ماده م ی تواند به راحتی در سراسر گیاه انتقال یابد و به عنوان یک پیام مولکولی درونی برای ایجاد مقاومت در گیاهان تحت شرایط تنش بکار گرفته میشود . - Wang et al, 2006 - هنگامیکه گیاهان در برابر تنش های زنده و غیر زنده مثل سرمای بهاره قرار میگیرند، پروتئین هایی در برابر این تنشها تولید میکنند که این پروتئینها در اثر القای هورمونهای گیاهی نظیر اسید آبسیزیک و سالیسیلیک اسید بوجود میآیند و گیاه را در مقابل تنش بوجود آمده مقاوم میکنند
تیمار خارجی کلسیم نیز در بسیاری از میوهها از قبیل سیب، هلو و توت فرنگی باعث بهبود شاخص های انبارداری آنها میشود. همینطور کلسیم باعث کاهش سرعت پیر شدن، رسیدگی، ایجاد تحمل به پاتوژنها و کاهش حساسیت به سرمازدگی در میوهها و سبزیهای مختلف بوسیله به تاخیر انداختن پیری دیواره سلولی و نگهداری و ثبات غشا و طولانی کردن ظرفیت غشا در انتقال سیگنالهای سلولی میشود. کلسیم سبب تنظیم بسیاری از فرآیندهای متابولیسمی و حالت نیمه تراوایی غشائ سلولی، تقسیم سلولی، نشت یونی و حرکت میکروتوبول ها میگردد
همچنین کلسیم سبب افزایش سختی در غشای میانی دیواره سلولی می شود. در اثر سرمازدگی، کلسیم موجود در دیواره سلولی خارج شده و استحکام دیواره سلولی کاهش مییابد
در سالهای اخیر مواد تجاری بسیاری تحت عنوان مواد ضد سرما وارد بازار شده است ولیکن کارایی آنها در کنترل سرما مشخص نشده است. در این پروژه کارایی سالیسیلیک اسید و کلسیم بر کاهش خسارت ناشی از سرمای بهاره بر روی درخت پسته مشخص خواهد شد.
مواد و روشها
جهت بررسی اثر سالیسیلیک اسید، کلسیم و تیمار سرما و همچنین برهمکنش آنها بر دانهال های پسته رقم کلهقوچی درمحیط گلخانه، آزمایشی بصورت فاکتوریل در قالب طرح کاملا تصادفی و در سه تکرار در دانشگاه ولیعصر رفسنجان - عج - انجام شد. تیمارها شامل سالیسیلیک اسید - صفر، 0,75 و 1,5 میلی مولار - ، کلسیم - صفر، 3 و 6 در هزار - و دما - صفر، -2 و - - 4 بودند. بذرهای مورد نظر از موسسه تحقیقات پسته کشور تهیه گردید. 81 عدد گلدان یک کیلوگرمی تهیه و از خاکی که از عمق صفر تا 30 سانتیمتری از یکی از باغهای استان کرمان تهیه شده بود پر و در هر گلدان سه بذر کشت داده شد.
آبیاری گلدان ها بوسیلهی آب مقطر تا رسیدن به ظرفیت مزرعه همراه با توزین مرتب آنها صورت گرفت. اعمال تیمار ها بدین صورت بود که دانهالهای پسته زمانیکه در مرحله 6 تا 8 برگی رسیدند، در دو نوبت با فاصله 3 روز با سالیسیلیک اسید و کلسیم محلول پاشی شدند - تیمار شاهد از آب استفاده شد - . سپس سه روز پس از محلول پاشی دوم دانهالها جهت سرمادهی داخل Growth Chamber قرار گرفتند.
بدین منظور ابتدا با آب مقطر اسپری و سپس داخل دستگاه قرار گرفتند. دمای Growth Chamber با سرعت انجماد 10 درجه سلسیوس در ساعت تا 2 درجه خنک شده سپس با سرعت انجماد 5 درجه سلسیوس در ساعت تا دمای ذکر شده ادامه یافت. نمونه ها در هر دما به مدت 3 ساعت نگهداری شدند. سپس تعدادی برگ از هر بوته جدا و به آزمایشگاه منتقل شد.
به منظور اندازهگیری میزان ترکیبات فنلی، 0,1 گرم از نمونه برگ تهیه پس از مقدمات کار - Isfendiyaroglu, and Zeker, 2002 - توسط دستگاه اسپکتروفتومتر در طول موج 200 نانومتر قرائت شد. برای استخراج پرولین از روش - Paquinand Lechasseur, 1979 - و نشت یونی نیز از روش - Korkmaz et al., 2010 - استفاده گردید.
نتایج و بحث
نتاج تجزیه واریانس نشان داد - جدول - 1، که سالیسیلیک اسید، کلسیم و دما و همچنین برهمکنش آنها بر پرولین برگ معنی دار بود. همانگونه که در جدول مقایسه میانگینها مشاهده میشود - جدول - 2، کاهش دما از صفر به -4 درجه سلسیوس موجب افزایش معنیداری در میزان پرولین برگ نسبت به شاهد شد به طوری که بیشترین محتوای پرولین در دمای - 4 درجه سلسیوس و کمترین آن در دمای صفر درجه سلسیوس بود.
در دمای صفر درجه سلسیوس، کاربرد 6 در هزار کلسیم به تنهایی، موجب افزایش محتوای پرولین برگ به میزان حدود 54 درصد نسبت به شاهد شد. بیشترین محتوای پرولین برگ در هر سه دما مربوط به مصرف سالیسیلیک اسید و کلسیم در بالاترین غلظتهای خود 1,5 - میلی مولار سالیسیلیک اسید و 6 کیلوگرم در هزار لیتر - بود.
جدول -1 تجزیه وایانس اسید سالیسیلیک، کلسیم و دما بر میزان پرولین برگ دانهال های پسته
جدول -2 مقایسه میانگین برهمکنش اثر سالیسیلیک اسید و غلظتهایی مختلف کلسیم بر مقدار پرولین - میکروگرم بر گرم وزن تر - برگ پسته در شرایط تنش سرمایی
نتاج تجزیه واریانس نشان داد - جدول - 3، که اثرهای ساده سالیسیلیک اسید، کلسیم و دما ، همچنین اثر برهمکنش آنها بر محتوای ترکیبات فنلی برگ معنی دار بود. همانگونه که در جدول مقایسه میانگینها - جدول - 4 مشاهده میشود، کاهش دما از صفر به - 4 درجه سلسیوس موجب افزایش محتوای ترکیبات فنلی شد به طوری که بیشترین محتوای ترکیبات فنلی در دمای-4 بدست آمد که با دمای صفر اختلاف معنی داری داشت. کمترین میزان ترکیبات فنلی مربوط به سطح 6 - کیلوگرم در هزار لیتر - کلسیم در دمای صفر می باشد. همچنین بیشترین میزان ترکیات فنلی مربوط به مصرف توامان سالیسیلیک اسید و کلسیم - 1,5 میلی مولار سالیسیلیک اسید و 6 کیلوگرم بر هزار لیتر کلسیم - بود که موجب افزایش 21 درصدی این پارامتر گردید.
جدول -3 تجزیه وایانس اسید سالیسیلیک، کلسیم و دما بر ترکیبات فنل دانهال های پسته
نتاج تجزیه واریانس نشان داد - جدول - 5، که اثرهای ساده سالیسیلیک اسید، کلسیم و دما ، همچنین اثر برهمکنش آنها بر میزان نشت الکترولیت برگ معنی دار بود. همان گونه که در جدول مقایسه میانگین داده ها - جدول - 6 مشاهده میشود، کاهش دما از صفر به -4 درجه سلسیوس موجب افزایش درصد نشت الکترولیت برگ - شاهد - شد و بیشترین درصد نشت الکترولیت در دمای -4 درجه سلسیوس و کمترین آن در دمای صفر درجه سلسیوس بود.
تیمار 1,5 میلی مولار سالیسیلیک اسید در دمای -4 درجه سلسیوس موجب کاهش نشت الکترولیت به میزان30 درصد و همچنین تیمار3 در هزار کلسیم باعث کاهش21 درصدی نشت الکترولیت در دمای -4 درجه سلسیوس نسبت به شاهد شد. در حالیکه مصرف توامان بالاترین غلضت های سالیسیلیک اسید و کلسیم موجب کاهش 47 درصدی نشت یونی نسبت به شاهد در دمای -4 درجه سلسیوس شد.
