بخشی از مقاله
چکیده
در این پژوهش تاثیر علف کش راند آپ و غلظت های متفاوت آن در بلوغ برون تنی اووسایت های بز مورد بررسی قرار گرفت. برای تهیه ی اووسایت های بز، تخمدان ها بلافاصله بعد از کشتار، از لاشه ی دام جدا و درون فلاسک حاوی سرم فیزیولوژیک در دمای 30-34 درجه ی سانتی گراد و به آزمایشگاه منتقل شدند. کمپلکس اووسایت کومولوس با روش برشی از فولیکول های آنترال کوچک - 2-6 mm - تخمدان جدا، و در محیط بلوغ اووسایت کشت داده شدند. اووسایت ها پس از کشت در محیط بلوغ حاوی دز های متفاوت راند آپ بعد از 24 ساعت، به مرحله ی متافاز - بلوغ هسته ای - می رسند. پژوهش در قالب طرح کاملا تصادفی، با چهار تیمار آزمایشی شامل تیمارهای شاهد، 1500 ، 750 و375 میکرو مولار از سم راند آپ و در ده تکرار انجام شد. یافته های حاصل از این پژوهش نشان داد که اضافه کردن غلظت های متفاوت راند آپ به محیط کشت، نرخ بلوغ برون تنی اووسایت ها را به طور معنی داری - P < 0/05 - نسبت به گروه شاهد کاهش داد.
کلمات کلیدی: راند آپ، بلوغ برون نتی، اووسایت بز.
مقدمه و هدف
همزمان با افزایش جمعیت و نیاز به تولید بیشتر مواد غذایی، آفت کش ها برای کنترل آفات و بیماری ها در دام و محصولات کشاورزی مورد استفاده قرار گرفته اند. آفت کش ماده یا مخلوطی از مواد است که به منظور پیشگیری، نابودی، دفع یا کاهش هر گونه آفت به کار می رود. سموم آفت کش انتخابی عمل نمی کنند، به این ترتیب که علاوه موجودات هدف، روی موجودات غیر هدف - انسان و دام - نیز اثر می گذارند .[1] متاسفانه، استفاده ی بی رویه از آفت کش ها، باعث صدمه به محیط زیست و گیاهان، حیوانات، آب، زمین و یا خاک شده است. به همین منظور پژوهشی برای بررسی اثر علف کش راند آپ بر بلوغ برون تنی اووسایت بز در شرایط آزمایشگاهی انجام شد.
تئوری و پیشینه تحقیق
تاثیر آلاینده های زیست محیطی، از جمله علف کش ها در تولید مثل انسان و حیوان امری نگران کننده است. حیوانات اهلی - از جمله گوسفند و دیگر نشخوار کنندگان - ممکن است با گذشت زمان در معرض غلظت های متفاوت آلاینده های زیست محیطی قرار گیرند، که این امر باروری دام را تحت تاثیر قرار می دهد .[3] سموم شیمیایی باعث ایجاد تغییرات در رفتار تولید مثلی، کاهش باروری، سقط، عقب ماندگی رشد، مرگ نوزاد و پس روی تخمدان می شوند .[4] همچنین این مواد شیمیایی در انسان باعث مسمومیت کوتاه و بلند مدت، سرطان زایی، ایجاد جهش، عقیمی و غیره می شود .[5] آترازین یکی از موثر ترین علف کش مورد استفاده برای کنترل علف های هرز در مزارع کشاورزی است که استفاده از آن در برخی کشور ها ممنوع اعلام شده است .[6]
مواد و روش ها
برای تهیه ی اووسایت های بز، تخمدان ها بلافاصله بعد از کشتار از لاشه ی دام جدا شده و درون فلاسک حاوی سرم فیزیولوژیک در دمای 30-34 و در کمتر از یک ساعت به آزمایشگاه منتقل شدند. کمپلکس اووسایت کومولوس با روش برشی از فولیکول های آنترال کوچک - 2-6 mm - تخمدان جدا شدند. اووسایت هایی که دارای سیتوپلاسم یکنواخت و پوشیده از کومولوس بودند انتخاب و بعد از چهار بار شست و شو با محلول SOF HEPES وارد محیط کشت بلوغ اووسایت شدند. کشت اووسایت ها در محیط کشت شامل TCM-191 به همراه 250 نانوگرم در میلی لیتر hMG2 - به همراه هورمون های LH و FSH گوسفندی - ، 10 درصد FCS3، 11ʽg/ml پیروات، 2/2ʽg/ml سدیم بیکربنات، 50ʽg/ml پنی سیلین و استرپتومایسین انجام شد. در هر قطره محیط کشت 50 میکرولیتری، 9-11 کمپلکس اووسایت کومولوس قرار داده شده و درون انکوباتور با 5 درصد CO2، دارای 98 درصد رطوبت نسبی در دمای 38/5 درجه سانتیگراد نگهداری می شود. پس از 24 ساعت اووسایتها به مرحله بلوغ خواهند رسید. برای اندازه گیری نرخ بلوغ، اووسایت ها از قطره های محیط کشت خارج و توسط آنزیم هیالورونیداز، سلول های کومولوس از اووسایت ها جدا شدند. بر اساس دیدن جسم قطبی، نرخ اووسایت هایی که به مرحله ی بلوغ هسته ای رسیدند، مشخص شد. آزمایش در قالب طرح کاملا تصادفی با چهار تیمار و ده تکرار انجام شد. آنالیز آماری داده ها با استفاده از نرم افزار SAS و مقایسه ی میانگین ها با استفاده از آزمون دانکن انجام شد. تیمار های آزمایشی شامل تیمارهای شاهد، 1500 ، 750 و 375 میکرو مولار از علف کش راند آپ بود.
نتایج و بحث
در این پژوهش تعداد 715 اووسایت نابالغ سالم از تخمدان بز های کشتارگاهی جمع آوری شد و در چهار تیمار آزمایشی مورد بررسی قرار گرفت. گروه شاهد شامل 170 اووسایت نابالغ، که به مدت 24 ساعت در محیط کشت بلوغ و در انکوباتور کشت داده شده بودند، که در 87% 0/58 از این اووسایت ها بلوغ هسته ای دیده شد. در تیمار با دز 1500 میکرو مولار، از 155 اووسایتی کشت داده شدند، 5/75% 1/75 اووسایت ها به مرحله ی بلوغ هسته ای رسیدند. از مجموع 210 اووسایت نابالغ در تیمار با دز 750 میکرو مولار، در 51/7% 2/6 اووسایت ها بلوغ مشاهده شد، و در تیمار 375 میکرو مولار از مجموع 180 اووسایت نابالغ، 67/6 % 0/9 اووسایت ها به بلوغ رسیدند. تاثیر غلظت های راند آپ بر بلوغ برون تنی اووسایت بز در نگاره 1 نشان داده شده است. نگاره :1 تاثیر غلظت های متفاوت راند آپ بر بلوغ برون تنی اووسایت بز. حروف، نشان دهنده ی تفاوت معنی دار در سطح 5 درصد است.
نتایج نشان داد که غلظت های 1500، 750 و 375 میکرو مولار از سم راند آپ نسبت به تیمار شاهد باعث تفاوت معنی دار - - P < 0/05 در نرخ بلوغ برون تنی اووسایت بز شده است. پژوهش های انجام شده نشان داد که علف کش راند آپ اثر منفی روی نمو برون تنی اووسایت پستانداران دارد. پژوهش ها نشان می دهند که قرار گرفتن در معرض راند آپ با مهار فعالیت آنزیم آروماتاز و سنتز استروژن تولید مثل و نمو جنینی انسان را تحت تاثیر قرار می دهد .[2] همچنین در پژوهشی دیگر، راند آپ با اختلال در بیان ژن StAR1، باعث کاهش استروئید سازی و باروری در انسان می شود .[7] به طور کلی نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد که درصد بلوغ اووسایت ها در گروه شاهد نسبت به تیمار هایی که دارای غلظت های متفاوت سم راند آپ بودند به طور قابل ملاحظه ای بیشتر بوده و اختلاف معنی داری بین تیمار های آزمایشی وجود دارد. هم چنین افزودن سم راند آپ باعث کاهش نرخ بلوغ اووسایت ها شده است.
پیشنهادات
با توجه به اثرات نامطلوب علف کش راند آپ که در این پژوهش منجر به کاهش نرخ بلوغ اووسایت های بز شده است، پیشنهاد می شود که به جای استفاده از این علف کش ها به عنوان یک سم پر کاربرد کشاورزی، برای از بین بردن آفات و علف های هرز از روش های دیگر مانند روش های بایولوژیک استفاده شود.
چکیده
در این پژوهش تاثیر علف کش راند آپ و غلظت های متفاوت آن در بلوغ برون تنی اووسایت های بز مورد بررسی قرار گرفت. برای تهیه ی اووسایت های بز، تخمدان ها بلافاصله بعد از کشتار، از لاشه ی دام جدا و درون فلاسک حاوی سرم فیزیولوژیک در دمای 30-34 درجه ی سانتی گراد و به آزمایشگاه منتقل شدند. کمپلکس اووسایت کومولوس با روش برشی از فولیکول های آنترال کوچک - 2-6 mm - تخمدان جدا، و در محیط بلوغ اووسایت کشت داده شدند. اووسایت ها پس از کشت در محیط بلوغ حاوی دز های متفاوت راند آپ بعد از 24 ساعت، به مرحله ی متافاز - بلوغ هسته ای - می رسند. پژوهش در قالب طرح کاملا تصادفی، با چهار تیمار آزمایشی شامل تیمارهای شاهد، 1500 ، 750 و375 میکرو مولار از سم راند آپ و در ده تکرار انجام شد. یافته های حاصل از این پژوهش نشان داد که اضافه کردن غلظت های متفاوت راند آپ به محیط کشت، نرخ بلوغ برون تنی اووسایت ها را به طور معنی داری - P < 0/05 - نسبت به گروه شاهد کاهش داد.
کلمات کلیدی: راند آپ، بلوغ برون نتی، اووسایت بز.
مقدمه و هدف
همزمان با افزایش جمعیت و نیاز به تولید بیشتر مواد غذایی، آفت کش ها برای کنترل آفات و بیماری ها در دام و محصولات کشاورزی مورد استفاده قرار گرفته اند. آفت کش ماده یا مخلوطی از مواد است که به منظور پیشگیری، نابودی، دفع یا کاهش هر گونه آفت به کار می رود. سموم آفت کش انتخابی عمل نمی کنند، به این ترتیب که علاوه موجودات هدف، روی موجودات غیر هدف - انسان و دام - نیز اثر می گذارند .[1] متاسفانه، استفاده ی بی رویه از آفت کش ها، باعث صدمه به محیط زیست و گیاهان، حیوانات، آب، زمین و یا خاک شده است. به همین منظور پژوهشی برای بررسی اثر علف کش راند آپ بر بلوغ برون تنی اووسایت بز در شرایط آزمایشگاهی انجام شد.
تئوری و پیشینه تحقیق
تاثیر آلاینده های زیست محیطی، از جمله علف کش ها در تولید مثل انسان و حیوان امری نگران کننده است. حیوانات اهلی - از جمله گوسفند و دیگر نشخوار کنندگان - ممکن است با گذشت زمان در معرض غلظت های متفاوت آلاینده های زیست محیطی قرار گیرند، که این امر باروری دام را تحت تاثیر قرار می دهد .[3] سموم شیمیایی باعث ایجاد تغییرات در رفتار تولید مثلی، کاهش باروری، سقط، عقب ماندگی رشد، مرگ نوزاد و پس روی تخمدان می شوند .[4] همچنین این مواد شیمیایی در انسان باعث مسمومیت کوتاه و بلند مدت، سرطان زایی، ایجاد جهش، عقیمی و غیره می شود .[5] آترازین یکی از موثر ترین علف کش مورد استفاده برای کنترل علف های هرز در مزارع کشاورزی است که استفاده از آن در برخی کشور ها ممنوع اعلام شده است .[6]
مواد و روش ها
برای تهیه ی اووسایت های بز، تخمدان ها بلافاصله بعد از کشتار از لاشه ی دام جدا شده و درون فلاسک حاوی سرم فیزیولوژیک در دمای 30-34 و در کمتر از یک ساعت به آزمایشگاه منتقل شدند. کمپلکس اووسایت کومولوس با روش برشی از فولیکول های آنترال کوچک - 2-6 mm - تخمدان جدا شدند. اووسایت هایی که دارای سیتوپلاسم یکنواخت و پوشیده از کومولوس بودند انتخاب و بعد از چهار بار شست و شو با محلول SOF HEPES وارد محیط کشت بلوغ اووسایت شدند. کشت اووسایت ها در محیط کشت شامل TCM-191 به همراه 250 نانوگرم در میلی لیتر hMG2 - به همراه هورمون های LH و FSH گوسفندی - ، 10 درصد FCS3، 11ʽg/ml پیروات، 2/2ʽg/ml سدیم بیکربنات، 50ʽg/ml پنی سیلین و استرپتومایسین انجام شد. در هر قطره محیط کشت 50 میکرولیتری، 9-11 کمپلکس اووسایت کومولوس قرار داده شده و درون انکوباتور با 5 درصد CO2، دارای 98 درصد رطوبت نسبی در دمای 38/5 درجه سانتیگراد نگهداری می شود. پس از 24 ساعت اووسایتها به مرحله بلوغ خواهند رسید. برای اندازه گیری نرخ بلوغ، اووسایت ها از قطره های محیط کشت خارج و توسط آنزیم هیالورونیداز، سلول های کومولوس از اووسایت ها جدا شدند. بر اساس دیدن جسم قطبی، نرخ اووسایت هایی که به مرحله ی بلوغ هسته ای رسیدند، مشخص شد. آزمایش در قالب طرح کاملا تصادفی با چهار تیمار و ده تکرار انجام شد. آنالیز آماری داده ها با استفاده از نرم افزار SAS و مقایسه ی میانگین ها با استفاده از آزمون دانکن انجام شد. تیمار های آزمایشی شامل تیمارهای شاهد، 1500 ، 750 و 375 میکرو مولار از علف کش راند آپ بود.
نتایج و بحث
در این پژوهش تعداد 715 اووسایت نابالغ سالم از تخمدان بز های کشتارگاهی جمع آوری شد و در چهار تیمار آزمایشی مورد بررسی قرار گرفت. گروه شاهد شامل 170 اووسایت نابالغ، که به مدت 24 ساعت در محیط کشت بلوغ و در انکوباتور کشت داده شده بودند، که در 87% 0/58 از این اووسایت ها بلوغ هسته ای دیده شد. در تیمار با دز 1500 میکرو مولار، از 155 اووسایتی کشت داده شدند، 5/75% 1/75 اووسایت ها به مرحله ی بلوغ هسته ای رسیدند. از مجموع 210 اووسایت نابالغ در تیمار با دز 750 میکرو مولار، در 51/7% 2/6 اووسایت ها بلوغ مشاهده شد، و در تیمار 375 میکرو مولار از مجموع 180 اووسایت نابالغ، 67/6 % 0/9 اووسایت ها به بلوغ رسیدند. تاثیر غلظت های راند آپ بر بلوغ برون تنی اووسایت بز در نگاره 1 نشان داده شده است. نگاره :1 تاثیر غلظت های متفاوت راند آپ بر بلوغ برون تنی اووسایت بز. حروف، نشان دهنده ی تفاوت معنی دار در سطح 5 درصد است.
نتایج نشان داد که غلظت های 1500، 750 و 375 میکرو مولار از سم راند آپ نسبت به تیمار شاهد باعث تفاوت معنی دار - - P < 0/05 در نرخ بلوغ برون تنی اووسایت بز شده است. پژوهش های انجام شده نشان داد که علف کش راند آپ اثر منفی روی نمو برون تنی اووسایت پستانداران دارد. پژوهش ها نشان می دهند که قرار گرفتن در معرض راند آپ با مهار فعالیت آنزیم آروماتاز و سنتز استروژن تولید مثل و نمو جنینی انسان را تحت تاثیر قرار می دهد .[2] همچنین در پژوهشی دیگر، راند آپ با اختلال در بیان ژن StAR1، باعث کاهش استروئید سازی و باروری در انسان می شود .[7] به طور کلی نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد که درصد بلوغ اووسایت ها در گروه شاهد نسبت به تیمار هایی که دارای غلظت های متفاوت سم راند آپ بودند به طور قابل ملاحظه ای بیشتر بوده و اختلاف معنی داری بین تیمار های آزمایشی وجود دارد. هم چنین افزودن سم راند آپ باعث کاهش نرخ بلوغ اووسایت ها شده است.
پیشنهادات
با توجه به اثرات نامطلوب علف کش راند آپ که در این پژوهش منجر به کاهش نرخ بلوغ اووسایت های بز شده است، پیشنهاد می شود که به جای استفاده از این علف کش ها به عنوان یک سم پر کاربرد کشاورزی، برای از بین بردن آفات و علف های هرز از روش های دیگر مانند روش های بایولوژیک استفاده شود.
