بخشی از مقاله
چکیده
بید کلم Plutella xylostella L. به عنوان یکی از مهمترین آفات خانواده چلیپاییان شناخته میشود. گزارشات علمی متعددي مبنی بر مقاومت آفت بید کلم به حشره کشهاي شیمیایی و حتی بیولوژیک - Bt. - در جهان منتشر شده است. ویروس گرانولوویروس بید کلم Plutella xylostella granulovirus - PxGV - به عنوان یکی از عوامل میکروبی موثر در کنترل آفت شناخته شده است. حساسیت به نور ماوراء بنفش و سرعت پایین در کشتن میزبان از جمله عوامل تاثیر گذار در کاهش اقبال عمومی در کاربرد حشره کشهاي ویروسی درکنترل آفات ارزیابی شده است. یکی از روشهاي فائق آمدن بر این مشکل استفاده از تکنیکهاي فرمولاسیون می باشد.
در بررسی هاي آزمایشگاهی چهار نوع فرمولاسیون میکروانکپسولیت PxGV با کدهاي CAP, KLM, CLM و KAL و با غلظت 1.4 × 1010 گرانول بر گرم تولید و ارزیابی گردید. نتایج نشان داد که فرمولاسیون هاي تولیدي قبل از در معرض قرار گرفتن اشعه ماوراء بنفش بطور معنی داري بر روي باقیمانده فعالیت گرانولوویروس در مقایسه با تیمار شاهد اختلاف داشتند . فرمولاسیون CLM با % 98.60 بالاترین مرگ و میر را بعد از در معرض قرار گرفتن نور ماوراء بنفش نشان داد. الحاق ملاس ، لیگنین و نشاسته تغییر شکل یافته - به عنوان حامل - به سوسپانسیون ویروس با استفاده از تکنیک اسپري درایر موجب افزایش اثر بخشی و مرگ و میربالاي لارو هاي پروانه بید کلم گردید.
کلمات کلیدي: پروانه بید کلم، گرانولوویروس بید کلم، فرمولاسیون حشره کش بیولوژیک، باکولوویروس
مقدمه:
باکولوویروسها به عنوان عوامل بیولوژیک موثر در کنترل تعداد زیادي از آفات مهم کشاورزي شناخته شده اند. تجاري سازي باکولوویروسها به عنوان حشره کش بیولوژیک بوسیله عواملی از جمله عدم پایداري در محیط و انبار و سرعت پایین کشندگی میزبان محدود شده است. دانشمندان با استفاده از روشهاي مهندسی ژنتیک نظیر بیان ژن پروتئین هاي خارجی در ژنوم باکولوویروسها و افزودن حاملها و افزاینده هاي مختلف از طریق روشهاي فرمولاسیون سعی در فائق آمدن بر این مشکل دارند. در حال حاضر گونه هاي وحشی باکولوویروسها بصورت تجاري قابل دستسرس هستند - Mishra 1998; Moscardi . 1999 - استفاده از مواد افزودنی نظیر فلورسنت برایتنر ها در فرمولاسیونهاي پودري قابل حل در آب موجب افزایش فعالیت باقیمانده باکولوویروس ها میشود - Burg and Jones, 1998 ; Dougherty et al. 1996; Shaprio and .Robertson, 1992 -
علی رغم اهمیت فرمولاسیون در عملکرد باکولوویروسها، تا کنون توجه کمتري به آن شده است. باقیمانده فعالیت باکولوویروس ها بشدت تحت تاثیر نور ماوراء بنفش در طول موج 290 تا 320 نانومتر میباشد. روشهاي مختلف فرمولاسیون نظیر میکروانکپسولیشن که توسط ماشین اسپري درایر تولید میشود - Tamez-Guerra et al.,2000; Dezianian, 2011 - موجب افزایش کارایی باکولویروس - AcNPV - همراه با مواد افزودنی استفاده شده است. در این مطالعه گرانولوویروس بید کلم - - PxGV با مواد حامل و سایر مواد افزودنی ترکیب و توسط ماشین اسپري درایر فرموله و تاثیر آن بر روي کارایی ویروس در مقابل اشعه ماوراء بنفش ارزیابی گردید.
مواد و روشها:
لارو پروانه بید کلم مورد نیاز بر روي غذاي مصنوعی پرورش داده شد. جدایه تایوانی گرانولوویروس بید کلم - PxGV - بر روي لاروهاي پروانه بید به روش آلوده سازي برگ کلم - Odindo, 1981 - - با کمی تغییرات - تکثیر و ویروس پس از خالص سازي از بدن لاروهاي بیمار - توسط روش - - O´Reilly et al., 1994 - با کمی تغییرات - در فریزر -20 درجه سانتیگراد براي آزمایشات تکمیلی نگهاري میگردید.براي تهیه فرمولاسیون هاي مختلف ابتدا غلظت مشخصی از ویروس را بر اساس وزن مواد خشک به فرمولاسیون اضافه و سپس سوسپانسیون مربوطه از ماشین اسپري درایر عبور داده شد.
فرمولاسیون میکروانکپسولیت با غلظت 1.4 × 1010 گرانول بر گرم - شامل نشاسته تغییر شکل یافته + لیگنین + ملاس+ ویروس - CLM - ، کائولین + لیگنین + ملاس+ ویروس - KLM - وکائولین + ویروس - - KAL و نشاسته تغییر شکل یافته + ویروس - - - CAP تولید و در شیشه درب دار استریل براي آزمایشات بعدي نگهداري گردید. خصوصیات فیزیکی فرمولاسیونهاي تولیدي توسط SEM مطالعه گردید.. تست هاي زیست سنجی بمنظور ارزیابی فرمولاسیون ها در قبل و بعد از در معرض قرار دادن نور ماوراء بنفش انجام گردید. روش آزمون زبست سنجی
