بخشی از مقاله
چکیده:
هدف از این مطالعه، بررسی اثر ضد باکتریایی سینامالدئید و اسید لاکتیک برای مهار باکتری اشریشیا کولای است. سینامالدئید و اسید لاکتیک، با استفاده از تست های حداقل غلظت مهار کنندگی - MIC - به روش استاندارد میکرودایلوشن و حداقل غلظت کشندگی - MBC - در برابر اشریشیا کولای مورد بررسی قرار گرفت.
سینامالدئید اثر مهاری قوی نسبت به اسید لاکتیک نشان داد، و میزان MIC آن ها در برابر این باکتری به ترتیب 0/312 و 2/5 میکرولیتر در میلی لیتر و MBC آن ها نیز به ترتیب 0/312 و2/5میکرولیتر در میلی لیتر بود. این نتایج نشان داد که سینامالدئید و اسید لاکتیک دارای فعالیت ضد باکتریایی بسیار عالی در برابراین باکتری پاتوژن مواد غذایی هستند، بنابراین می توان از آن ها به عنوان یک جایگزین بی ضرر بجای نگه دارنده-های شیمیایی و آنتی بیوتیکها استفاده کرد.
مقدمه
اسانس های گیاهی، مخلوط های کمپلکسی از ترکیبات فرار تولید شده توسط ارگانیسم های زنده بوده که به روش های فیزیکی از همه گیاه، یا بخش هایی از گیاه مانند: برگ، گل، میوه، جوانه و شاخه ها بدست می آیند - . - 2010Tajkarimi, Ibrahim et al. و از دوران باستان به طور سنتی برای حفظ غذاها و همچنین بهبود عطر و طعم مواد غذایی مورد استفاده قرار گرفته اند.ترکیباتی معطر، آب گریز، تغلیظ شده و فرار هستند
بیش از 05 سال است که فعالیت ضد میکروبی ترکیبات معطر، شناخته شده است - . - 1979Morris, Khettry et al. این ترکیبات به علت اثر ممانعت کنندگی و کشندگی میکروارگانیسم های پاتوژن مورد توجه قرار گرفته اند - . - 2000Leistner به طور کلی ادویه جات و عصاره آنها و بیشتر اسانس ها بعنوان ضد باکتری امن - GRAS - 1 به رسمیت شناخته شده اند و برای مصرف کنندگان قابل قبول اند
به دلیل این که، در استفاده سنتی خود بدون هرگونه تاثیر مضر هستند و آنها طیف گسترده ضد میکروبیایی در برابر باکتری ها، مخمرها و کپک ها دارند
به طور کلی ترکیبات فنلی در برابر باکتری های گرم مثبت و گرم منفی موثر شناخته شده اند
سینامالدئید یک آروماتیک آلدهیدی و جزء اصلی عصاره پوست دارچین - حدود 50 درصد - است
مزیت اصلی سینامالدئید این است که بعنوان فعالیت ضد میکروبی نیازی به تماس مستقیم آن نیست و به عنوان یک مولکول GRAS توسط سازمان غذا و دارو ایالات متحده طبقه بندی شده است و برای استفاده در غذا تایید شده است
اداره غذا و دارو ایاﻻت متحده اسید های آلی را به عنوان GRAS برای مردم به رسمیت شناخته است
اثرات ضد میکروبی اسید های آلی مثل اسید لاکتیک به علت کاهش دادن pH به کمتر از حداقل مورد نیاز برای رشد و بازدارندگی متابولیکی ناشی از مولکول های تفکیک نشده اسید می باشد که از طریق جریان غشای سلولی و یونیزه کردن میکروارگانسیم ها باعث از بین رفتن آنها می شوند. بنابراین، به منظور حفظ pH داخل سلولی، یون های هیدروژن منتشر می شوند، و pH اسیدی در داخل ، سبب تغییر در شکل سلول ، آسیب به فعالیت های آنزیمی، پروتئین ها ، ساختار DNA و در نتیجه تخریب غشای خارج سلولی و فرآیندهای غشایی می شود
در این مطالعه، اثر غلظت های مختلف سینامالدئید 2/5 - ، 1/25، 0/625، 0/312، 0/156، 0/078، 0/039، 0/019 میکرولیتر در میلی لیتر - و اسیدلاکتیک 20 - ، 10، 5، 2/5، 1/25، 0/625، 0/312، 0/156 میکرولیتر در میلی لیتر - در محیط آبگوشت مغز و قلب جهت تعیین حداقل غلظت مهارکنندگی - MIC - 1 سینامالدئید و اسید لاکتیک به روش استاندارد میکرودایلوشن و همچنین حداقل غلظت کشندگی - MBC - 2 مورد بررسی قرار گرفت.
مواد و روش ها
سینامالدئید%99 از شرکت سیگما آلدریچ و اسید لاکتیک %90از کمپانی مواد شیمیایی مرک آلمانَ، محیطهای کشت میکروبی Brain Heart Infusion Agar- BHIA و Brain Heart Infusion Broth- BHIBاز شرکت بیولایف می باشند.
باکتری مورد مطالعه
ابتدا یک گرانول باکتری اشریشیاکولای از لولههای کرایوُ مورد نظر در شرایط سترون خارج و به 10 میلی لیتر محیط BHI براث منتقل شد و در دمای 37 درجه سانتی گراد نگهداری شد.
تهیه میزان تلقیح باکتری
باکتریها قبل از استفاده به طور متوالی دوبار تجدید کشت گردیدند. برای این منظور 5 - 4 کلنی باکتری از BHI آگار را به 10 میلی لیتر BHI براث منتقل شد و در 37 درجه سانتی گراد به مدت 24 ساعت انکوبه گردید. کشت دوم را با انتقال 100 میکرولیتر از سوسپانسیون باکتری به 10 میلی لیتر BHI براث تهیه و در 37 درجه سانتی گراد به مدت 20 ساعت نگهداری گردید. سپس از کشت 20 ساعته رقت لازم را تهیه و تعداد باکتری روی استاندارد 0/5 مک فارلند معادل cfu/ml تنظیم گردید و با دو بار رقیق سازی به در محیط کشت BHI broth تهیه گردید.
