بخشی از مقاله
مقدمه:
درمان مولکولی هدفمند یک استراتژی کاربردی با موفقیت کلینیکی را در درمان سرطان به وجود آورده است. درمان ایمونولوژیکی با استفاده از مونوکلونال آنتی بادی یک روش درمانی هدفمند به سمت آنتی ژن توموری می باشد . 1 مزیت اصلی رادیو ایمونو تراپی این است که آنتی بادی قادر به ایجاد اثرات سیتوتوکسیک بر روی سلولهای سرطانی از طریق مکانیسم های سیتوتوکسیسیته سلولی وابسته به آنتی بادی((ADCC، سیتوتوکسیسیته وابسته به کمپلمان (CDC) و القاء آپوپتوزیس به همراه اثرات تشعشعی می باشد . 2 هدف اصلی دررادیوایمونوتراپی انتقال دوز تشعشعی کشنده به سلولهای توموری می باشد که این ناشی از خصوصیات ایمونولوژیکی و فارماکولوژیکی آنتی بادیها (کلیرانس خونی آنتی بادیها، نفوذ به تومور و افینیته آنتی بادی به سلولهای توموری) و خصوصیات تشعشعی رادیونوکلید (نیمه عمر ، نوع و میزان اشعه ساطع شده) می باشد.
934
به طور کلی ،نیمه عمر یک رادیونوکلید باید با کینتیک in vivo آنتی بادی متناسب باشد Rituximab . 3 اولین منوکلونال آنتی بادی کایمریک IgG، بر علیه آنتی ژن CD20 لنفوسیت ها بود که در سال 1997 توسط FDA
تائید گردید . 4
لوتشیم - (177Lu)177 از بمباران 176Lu بصورت اکسید لوتشیم((176Lu2O3 در راکتور با شار نوترونیn/s/cm2
1/8×1013 به مدت یک هفته بدست میآید. لوتشیم انرژی بتای 490 kev و دو اشعه گاما با انرژی های Kev
208 و113 Kev دارد. اشعه بتای با انرژی متوسط، لوتشیم را یک کاندیدای خوب برای درمان سلولهای سرطانی با حداقل آسیب به بافت سالم کرده است(قدرت نفوذ در بافت.( 1/35 mm از طرفی لوتشیم به علت فلز بودن یک اتصال بسیار محکم و پایدار با انواع شلاتورها برقرار میکند که میتوان از آن بخوبی در شرایط درون تنی استفاده کرد. نیمه عمر 6/7 روز لوتشیم با نیمه عمر آنتی بادی در بدن همخوانی دارد . 5
176Lu (n, ) ➔ 177mLu ➔ 177Lu
روش کار:
(Mabthera) Ritoximab یک آنتی بادی موشی- انسانی بر علیه CD20 است که با چلاتور مناسب و لوتشیم-177 که محصول بمباران لوتشیم-176 در راکتور است نشاندار می شود. DOTA-NHS با آنتی بادی حل شده در بافر بورات pH=8-8,5 به نسبت مولی 1به 50 به مدت یک شب در یخچال واکنش میدهد تا کمپلکس DOTA-Ab تشکیل شود. سپس با استفاده از بافر استات pH=8-8,5 خالص سازی می شود. برای تهیه منحنی استاندارد سنجش غلظت شلاتور DOTA از کمپلکس استاندارد مس استفاده شد. در این روش بافر Cu(II)-Arsenazo(III)یک ترکیب آبی رنگ تولید می کند که با اسپکتروفوتومتر در طول موج 590 نانومتر قابل ردیابی است . 6 کمپلکس ( pH=8-8,5)DOTA-Ab با محلول لوتشیم-177 در اسید کلریدریک ./1 نرمال به مدت 3 ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد نشاندار می شود و به منظور خالص سازی از ستون سفادکس G-25 استفاده
935
شد. آنتی بادی نشاندار شده به نرمال سالین اضافه و به مدت 48 ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه و در فواصل زمانی 1و4و 8و24و48 ساعت از پایداری با روش کروماتوگرافی بر روی کاغذ واتمن بررسی شد. به منظور بررسی ایمونوری اکتیویتی آنتی بادی از سلولهای Raji استفاده شد. 100 میکروکوری از آنتی
CD20 نشاندار شده با لوتشیم-177 از طریق ورید به موش های نرمال با وزن تقریبی 35-25 گرم تزریق شد و موشها به 3 گروه 4 تایی تقسیم و در زمانهای 1و 4و 24 ساعت بعد از تزریق کشته شدند و خون واندامهای حیوان جدا شده و میزان اکتیویته در آنها با شمارش در دستگاه شمارنده گاما بدست آمد. درصد دوز دریافت شده در واحد وزن بافت (%ID/g) محاسبه گردید 6و7و. 8
نتایج:
بطور متوسط 3/5 مولکول DOTA به هر مولکول آنتی بادی متصل شد. نشاندارسازی با 6 میلی کوری
177LuCl3 به ازای 300 میکرو گرم آنتی بادی انجام شد و راندمان نشاندارسازی %92 بود.آزمایش پایداری
177Lu-DOTA-Rituximab نشان می دهد پس از گذشت 48 ساعت هنوز %82 از رادیواکتیویته به آنتی بادی
متصل باقی مانده است.
نمودار (1پایداری آنتی بادی نشاندار شده با لوتشیم-177 در زمانهای 1و3و 8 و48 24 ساعت در 4 درجه سانتیگراد
936
درصد بالای آنتی بادی در جریان خون نسبت به سایر اندامها از 4 ساعت تا 48 ساعت ، نشانگر نسبت بالای
Target/Non target می باشد.
