بخشی از مقاله
چکیده
به منظور بررسی تأثیر سطوح افزایشی کراتین هیدرولیز شده 0 - ، 3، 6 و 9 درصد - بر حفاظت آنتیاکسیدانی تخم بلدرچین تخمگذار از 64قطعه بلدرچین بالغ در قالب طرح کاملاً تصادفی با چهار تیمار و چهار تکرار انجام شد. تیمارهای آزمایشی شامل تیمار شاهد - استفاده از کنجاله سویا بهعنوان منبع پروتئین - ، تیمار 3 درصد کراتین هیدرولیز شده ، تیمار 6 درصد کراتین هیدرولیز شده و تیمار 9 درصد کراتین هیدرولیز شده بود.
در طول دوره ی پرورش بلدرچینها در قفس نگهداری شده و بهطور آزاد به آب و خوراک دسترسی داشتند. در انتهای دورهی آزمایش - هفته هفتم - از هر تکرار 2 قطعه پرنده انتخاب و کشتار شدند. در پایان آزمایش شاخصهای درصد تولید تخم، تری گلیسرید خون و میزان مالون دیآلدهید تخم بلدرچین در دو بازه زمانی اندازهگیری گردید. تفاوت معنیداری در درصد تولید تخم، تریگلیسرید خون مشاهده نشد، اما میزان مالون دیآلدهید در تیمار 3 درصد کراتین هیدرولیز شده، بهطور معنیداری - P<0/05 - ، پایینتر از سایر تیمارها بود. نتایج نشان داد که کراتین هیدرولیز شده باعث حفاظت آنتیاکسیدانی تخم در بلدرچین تخمگذار میشود.
مقدمه
هر پنج گروه افزودنیها شامل: آنتیاکسیدانها، ضد افسردگیها، ضد ویروسها، باکتریکشها و مسکنها ارتباط آشکاری با دامپروری دارند. از نظر فیزیولوژی تغذیه به دلیل اینکه اکسیداسیون نامطلوب میتواند تولید تغییرات ناخواسته در رنگ، طعم، عطر و سایر عوامل کیفیت گوشت ونیز خوراک را به همراه داشته باشد، آنتیاکسیدانها ممکن است شایسته توجه خاصی باشند . - Kanner et al., 1994 - اسیدهای چرب غیر اشباع با زنجیره بلند برای سلامتی انسان مفید میباشد که باعث شده است در تولیدات دامی مورد توجه قرار گیرد.
با این حال افزایش میزان اسیدهای چرب غیر اشباع باعث افزایش حساسیت چربی گوشت طیور به فساد اکسیداتیو شده است که منجر به تغییر در طعم و مواد مغذی گوشت میشود - Botsoglou et al., . - 2002 مکمل سازی جیره با آنتیاکسیدانهای طبیعی و سنتزی، ویتامین های محلول در چربی و آب، سلنیوم، اسیدآمینههای گوگرددار، تریپپتیدگلوتاتیون - گاما-ال- گلوتامیل-ال-سیستئینیل-گلایسین - ، فعالکنندههای آنزیم های میکروزومی و آنتی بیوتیکها برای خنثی کردن اثرات منفی آفلاتوکسینها در طیور استفاده شده است.
- Johri et al., 1990 - پاتپونگسیریپورن و همکاران - 2001 - اثر سطوح مختلف ویتامین 25 - E و 65 واحد بینالمللی در کیلوگرم - را بر میزان TBA - یک شاخص برای پراکسیداسیون لیپید - را در مرغهای تخم-گذار تحت شرایط استرس گرمایی مورد بررسی قراردادند. این مطالعه مشخص نمود که افزودن 65 واحد بین-المللی در کیلوگرم جیره منجر به افزایش ابقاء آلفا توکوفرول و در نتیجه واکنشهای پراکسیداسیون را در زرده تخممرغهای تولیدی در تنش گرمایی را کاهش میدهد . - Puthpongsiriporn et al., 2001 - هدف از این مطالعه بررسی سطوح افزایشی کراتین هیدرولیز شده 0 - ، 3، 6 و 9 درصد - بر حفاظت آنتیاکسیدانی تخم بلدرچین تخمگذار میباشد.
مواد و روشها
به منظور بررسی تأثیر سطوح افزایشی کراتین هیدرولیز شده 0 - ، 3، 6 و 9 درصد - بر حفاظت آنتیاکسیدانی تخم بلدرچین تخمگذار از 64قطعه بلدرچین بالغ در قالب طرح کاملاً تصادفی با چهار تیمار و چهار تکرار انجام شد. تیمارهای آزمایشی شامل تیمار شاهد - استفاده از کنجاله سویا به عنوان منبع پروتئین - ، تیمار 3 درصد کراتین هیدرولیز شده، تیمار 6 درصد کراتین هیدرولیز شده و تیمار 9 درصد کراتین هیدرولیز شده بود. پودر پَر پس از تعیین محتوای پروتئین در فرمولاسیون جیرههای آزمایشی استفاده شد. تعداد 4 تکرار برای هر تیمار و چهار بلدرچین - نسبت سه به یک - در هر واحد آزمایشی - قفس - در نظر گرفته شد. در طول دوره پرورش پرندهها بهطور آزاد به آب و غذا دسترسی داشتند.
محتوای پروتئین و انرژی در همه تیمارها یکسان در نظر گرفته شد. در طول دوره ی پرورش میزان تولید پرندهها در هر تیمار ثبت گردید. در انتهای دورهی آزمایش - هفته هفتم - از هر تکرار 2 قطعه پرنده انتخاب و کشتار شدند. شاخصهای درصد تولید تخم، تری گلیسرید خون و میزان مالوندی آلدهید تخم در دو شرایط - نگهداری در یخچال و نگهداری در فریزر - اندازه گیری گردید. برای اندازهگیری درصد تولید تخم، تخمبلدرچینهای تولیدی در هر روز جمع آوری شده و تعداد آنها به دقت ثبت میگردید.
در پایان هر هفته کل تخمبلدرچینهای تولیدی آن هفته جمع شده و تعداد آنها ثبت گردید. درصد تخمگذاری هر واحد آزمایشی عبارت از تقسیم تعداد کل تخم بلدرچینهای تولید شده بر روز مرغ همان واحد و ضرب حاصل آن در عدد 100 میباشد - تعداد روز مرغ در هفته به صورت حاصل جمع تعداد مرغهای آن واحد در طول روزهای یک هفته مطرح میشود - . زمان جمعآوری تخمبلدرچینها در یک ساعت مشخص انجام میشد و به دقت تخمهای شکسته شده نیز در این شمارش محسوب میشد. همچنین برای اندازهگیری تری گلیسرید خون، در روز کشتار از هر گروه آزمایشی 2 قطعه پرنده انتخاب و از قلب آنها در حدود 2 میلیلیتر خون گرفته شد و غلظت تریگلیسرید خون موجود در نمونههای سرم خون با کیت آزمایشگاهی و دستگاه اسپکتروفتومتر تعیین شد.
برای بررسی اکسیداسیون تخمها، تخمهای جمع آوری شده در هفته آخر آزمایش به دو دسته تقسیم شدند. زرده تخمها جداشده، دسته اول در یخچال نگهداری شد و دسته دوم در شرایط فریزر نگهداری گردید و میزان پراکسید موجود در آنها پس از یک هفته تعیین شد. برای اندازهگیری پراکسیداسیون چربیهای زرده از آزمایش اسید تیوباربیتوریک استفاده شد. این آزمایش بر مقدار جذب نوری کمپلکس صورتی رنگ حاصل از واکنش یک مولکول مالون دی آلدهید با دو مولکول از TBA استوار است.
مالون دی آلدهید محصول اصلی تجزیه هیدروپراکسیدهای چربی است. در آزمایش MDA به عنوان محصول ثانویه اکسیداسیون، توسط روش TBA که به وسیله بوتسوگلو و همکاران - 1994 - شرح دادهشده و با ایجاد تغییراتی مطابق با آنچه گالوبارت و همکاران - 2001 - انجام دادند اندازهگیری شد. روش انجام این آزمایش به صورت ذیل میباشد. یک گرم از نمونه زرده تخممرغ در داخل لوله آزمایش 25 میلیلیتری درپوش دار توزین شد.
2/5 میلیلیتر محلول 0/8 درصد هیدروکسی تولوئن بوتیله - BHT - در هگزان اضافه شده، بلافاصله قبل از همگن کردن 4 میلیلیتر از محلول آبی 5 درصد تری کلرو استیک اسید - TCA - اضافه شد، مخلوط حاصله به مدت 60 ثانیه با دور بالا ورتکس و سپس به مدت 3 دقیقه در 3000 g سانتریفیوژ شد، لایه فوقانی هگزان را دور ریخته و لایه آبی زیرین توسط کاغذ صافی واتمن شماره 1 فیلتر شد، حجم مخلوط توسط TCA به 5 میلیلیتر رسانده شد، مقدار 3 میلیلیتر 0/8 TBA درصد به مخلوط اضافه شد، مخلوط فوق به مدت 30 دقیقه در حمام آب گرم 70 درجه سلسیوس نگهداری و سپس در حمام آب یخ به مدت 7 دقیقه خنک شد، جذب نوری مخلوط واکنش توسط دستگاه اسپکتروفتومتر درطول موج 532 نانومتر خوانده شد و همان OD حاصل از دستگاه مورد مقایسه بین تیمارها قرار گرفت.
نتایج و بحث
همانطور که در جدول 1 مشاهده میشود، سطوح افزایشی کراتین هیدرولیز شده 0 - ، 3، 6 و 9 درصد - روی درصد تولید تخم بلدرچینتخمگذار و تریگلیسرید خون بلدرچینتخمگذار تفاوت معنیداری مشاهده نشد. سطوح افزایشی کراتین هیدرولیز شده 0 - ، 3، 6 و 9 درصد - در جیره بلدرچین تخمگذار روی میزان مالوندیآلدهید بلدرچین تخمگذار تأثیر معنیداری داشت - P<0/05 - ، بهطوری که در تیمار شاهد، بیشترین میزان مالوندی آلدهید هم در شرایط نگهداری در یخچال و هم در شرایط نگهداری در فریزر را داشت و در تیمار 3 درصد کراتین هیدرولیز شده، کمترین میزان مالوندی آلدهید هم در شرایط نگهداری در یخچال و هم در شرایط نگهداری در فریزر مشاهده گردید.
تریپپتید گلوتاتیون - GSH - نقش کلیدی در دفاع سلولی در مقابل آسیبهای اکسیدکنندهها و رادیکال های آزاد و همچنین در سمزدایی زنوبیوتیکهای الکتروفیل بازی میکند. به هر حال وقتی گلوتاتیون یا پیشسازهای اسیدآمینهای آن یعنی سیستئین به میزان 500 قسمت در میلیون به جیره اضافه شد، محافظت ملایمی در مقابل کاهش رشد ناشی از آفلاتوکسین B1 در جوجههای تغذیه شده باجیرهای حاوی 10 قسمت در میلیون مشاهده شد . - Dalvi et al., 1984 -
