بخشی از مقاله
چکیده
تأثیر پوسته سویا و اندازه قطعات علف خشک یونجه بر الیاف موثر فیزیکی جیره، تولید شیر و جمعیت باکتریهای سللولیتیک در گاوهای شیرده بررسی شد. در این مطالعه از 8 رأس گاو شیرده هلشتاین با میانگین شیردهی 47 13 روز در یک طرح مربع لاتین 4×4 چرخشی با روش فاکتوریل 2×2 استفاده شد. تیمارها شامل اندازه قطعات علف یونجه 5 - و 20 میلیمتر - و دو سطح پوسته سویا - صفر و 50 درصد جایگزین علف خشک یونجه - بود. علف یونجه بلند و پوسته سویا منجر به افزایش مقدار pef و peNDF جیره شد . - P<0/01 - مصرف peNDF با افزایش اندازه قطعات علف یونجه - P=0/04 - و پوسته سویا در جیره - P<0/01 - افزایش یافت. گاوهایی که از جیره حاوی پوسته سویا مصرف کردند شیر بیشتری تولید کردند . - P<0/05 - میزان چربی شیر با افزایش اندازه قطعات یونجه افزایش - P=0/03 - و با جایگزینی پوسته سویا کاهش - P<0/01 - یافت. علف بلند یونجه درصد چربی شیر را افزایش داد . - P<0/05 - تعداد کل باکتریها و باکتریهای سللولیتیک تحت تأثیر تیمارهای آزمایشی قرار نگرفت. واژههای کلیدی: الیاف موثر فیزیکی، پوسته سویا، باکتری های سللولیتیک، شکمبه، Real Time PCR، گاوهای شیرده.
مقدمه
پوسته سویا حاوی لیگنین اندک و مقدار زیادی از دیواره سلولی قابل هضم است و میتواند به عنوان جایگزینی مناسب به جای بخش علوفهای جیره استفاده گردد. جایگزینی جزئی پوسته سویا به جای بخش علوفهای جیره 14/5 - درصد ماده خشک جیره - در گاوهای شیرده در اوایل دوره شیرواری موجب افزایش تولید شیر و ابقاء بیشتر انرژی شد . - 2 - با وجود این جایگزینی پوسته سویا به جای بخش علوفه ای جیره بواسطه اندازه قطعات کوچک منجر به کاهش الیاف موثر فیزیکی جیره - 5 - و کاهش ثبات مواد سقف شکمبهای - 4 - در گاوهای شیرده شد. افزودن علوفه بلند به جیره میتواند اثرات منفی پوسته سویا را جبران و منجر به افزایش چربی شیر، کاهش نرخ عبور پوسته سویا از شکمبه، افزایش فعالیت نشخوار و افزایش هضم شکمبهای گردد 4 - و . - 5 تنها در یک مطالعه گزارش شده است که جمعیت باکتریهای R. albus و R. flavefaciens در شکمبه گاوهای شیرده تحت تأثیر اندازه قطعات جیره قرار نگرفت . - 7 - هدف اصلی از این مطالعه بررسی اثر اندازه قطعات علف یونجه و جایگزینی پوسته سویا بر الیاف موثر فیزیکی جیره، تولید و ترکیب شیر وجمعیت باکتریهای سللولیتیک در شکمبه گاوهای شیرده هلشتاین بود.
مواد و روش ها
چهار جیره آزمایشی به 8 رأس گاو شیرده هلشتاین با میانگین شیردهی 47 13 روز در قالب طرح مربع لاتین 4×4 به صورت آرایش فاکتوریل 2×2 اختصاص داده شد. تیمارهای آزمایشی شامل اندازه قطعات علف خشک یونجه 5 - و 20 میلیمتر - و دو سطح پوسته سویا - صفر یا 50 درصد جایگزین علف خشک یونجه - بود. میزان پروتئین خام، NDF، NDF از منبع علوفهای و NEL به ترتیب در جیرههای فاقد پوسته سویا - به ترتیب %17/1، %31/3، %19/8 و 1/57 مگا کالری بر کیلوگرم ماده خشک - و در جیرههای حاوی پوسته سویا - به ترتیب %17/1، %32/3، %15/3 و 1/59 مگا کالری بر کیلوگرم ماده خشک - بود . - 3 - از چهار دوره آزمایشی استفاده شد و طول هر دوره 18 روز در نظر گرفته شد. گاوها روزانه سه بار دوشش شدند و ترکیبات شیر توسط میلکواسکن - Astori, Italy - اندازه گیری شد. میزان عامل موثر فیزیکی - pef - و الیاف موثر فیزیکی peNDF - ، با استفاده از NDF ذرات باقیماده بر روی هر الک - جیره و باقیمانده خوراک با استفاده از الکهای جدید دانشگاه پنسیلوانیا با اندازه منافذ 19، 8 و 1/18 میلیمتر اندازهگیری شد . - 6 - استخراج DNA از مایع شکمبه - قبل از خوراک صبحگاهی - گاوهای آزمایشی انجام شد
- AccuPrepTM, Bioneer Corporation - و با استفاده از پرایمرهای مختص گونهای مربوط به 16S rDNA جمعیت کل باکتریها، و باکتریهای فیبروباکتر سوکسینوژنز، رومینوکوکوس فلاووفیسنز و رومینوکوکوس آلبوس با استفاده از دستگاه Real-Time PCR - ABI 7300 - اندازه گیری شد. برای انجام واکنشها از کیتهای حاوی سایبرگرین شرکت سینتول روسیه - SYBR Green I - qPCR Master Mix, Syntol استفاده شد . شرایط واکنش PCR برای باکتریهای سللولیتیک و باکتریهای عمومی شامل یک چرخه به مدت 5 دقیقه با درجه حرارت 95 درجه سانتیگراد به منظور واسرشت سازی DNA، 35 چرخه شامل: 95 درجه سانتیگراد به مدت 15 ثانیه، 61 درجه سانتیگراد به مدت 15 ثانیه به منظور اتصال پرایمر به DNA، 72 درجه سانتیگراد به منظور بسط DNA هدف به مدت 30 ثانیه است. برای تهیه استاندارد از رقت های مختلف 330 - ، 33، 3/3 و 0/33 نانوگرم در میکرولیتر - از DNA کل باکتریهای شکمبهای که از باکتریهای مختلف شکمبهای که قبلاً تهیه و اندازه گیری شده بود، استفاده شد. تعداد کپی از DNA هر سه باکتری تجزیه کننده دیواره سلولی در هر گاو پس از هر واکنش PCR در مقایسه با تعداد کپی DNA کل باکتریها در همان گاو محاسبه شد. غلظت کل باکتریهای شکمبهای با استفاده از منحنی استاندارد و به صورت لگارتم تعداد کپی از ژن 16RNAS گزارش شد.
آنالیز آماری
تجزیههای آماری دادههای حاصل با استفاده از مدل طرح مربع لاتین در غالب چند مربع با استفاده از رویه آماری GLM به صورت زیر در نرم افزار SAS - نسخه - 9/1 و مقایسه میانگینها به روش توکی انجام شد.
که:=Yij - k - m مشاهدهij - kl - m، =ʽ میانگین، =SQm اثر مربع - شکم زایش - ، =Period - SQ - im اثر دوره i داخل مربع m؛= Cow - SQ - jm اثر گاوjداخل مربع m، - =A - k اثر سطح kاز فاکتور A، - =B - lاثر سطح Lاز فاکتور B،= - AB - kl اثر متقابل سطح k از فاکتور A با سطح I از فاکتور B،= ijk خطای تصادفی با میانگین صفر و واریانس .2
نتایج و بحث
اندازه قطعات و جایگرینی پوسته سویا بطور معنیداری عامل موثر فیزیکی و الیاف موثر فیزیکی را افزایش دادند . - P<0/01 - مصرف ماده خشک تحت تأثیر اندازه قطعات علف یونجه و پوسته سویا قرار نگرفت. تولید شیر تحت تأثیر پوسته سویا افزایش یافت - . - P<0/01 ولی تولید شیر تصحیح شده برای 4 درصد چربی تفاوت معنیداری بین تیمارها نداشت. به دلیل عدم تأثیر تیمارها بر مصرف خوراک افزایش تولید شیر تحت تأثیر پوسته سویا را میتوان به بیشتر بودن انرژی خالص شیرواری و پروتئین غیر قابل تجزیه در شکمبه در این جیرهها در مقایسه با جیرههای فاقد پوسته سویا نسبت داد. افزایش 7/4 درصد درتولید شیر را باجایگرینی 14/5 درصد ماده خشک از بخش علوفه ای جیره را گزارش شد . - 2 - در این مطالعه گاوهای تغذیه شده با پوسته سویا انرژی بیشتری در بدنشان ابقاء کردند . در نتیجه تولید شیر بیشتر در گاوهای تغذیه شده از جیره حاوی پوسته سویا در آزمایش حاضر ممکن است به دلیل ابقاء بیشتر انرژی که در گاوهای تازهزا اهمیت دارد، باشد.
از ترکیبات شیر فقط تولید چربی - کیلوگرم در روز - تحت تأثیر اندازه قطعات علف یونجه دارای روند افزایشی - P=0/09 - و تحت تأثیر پوسته سویا دارای روند کاهشی - P=0/15 - بود. میزان درصد چربی تحت تأثیر پوسته سویا در جیرهها به طور معنیداری کاهش یافت . - P<0/01 - اثر متقابل اندازه قطعات و پوسته سویا معنیدار و نشاندهنده تأثیر اندازه قطعات بر حفظ چربی شیر در جیره حاوی پوسته سویا بود.در آزمایشی استفاده از علف بلند یونجه توانست چربی شیر تولید شده را در مقایسه با جیره شاهد حفظ نماید . - 5 - پیشنهاد میشود - - 1 که اثر اندازه قطعات بر تولید چربی احتمالاً هنگامی که مقادیر NDF از حداقل نیاز توصیه شده توسط کمیته ملی تحقیقات - 2001 - یعنی 250 گرم NDF و 190 گرم NDF حاصل از علوفه در کیلوگرم جیره کمتر باشد، موثر است. در آزمایش حاضر با جایگزینی پوسته سویا NDF علوفهای از 198 گرم در کیلوگرم ماده خشک به 153 گرم در کیلوگرم ماده خشک حیره کاهش یافت که میتواند دلیل تأثیر اندازه قطعات بر افزایش چربی شیر باشد.
تعداد کل باکتریها و باکتریهای سللولیتیک تحت تأثیر تیمارهای آزمایشی قرار نگرفت - جدول . - 2 تغیر اندازه قطعات سیلاژ ذرت و در نتیجه فیبر موثر فیزیکی در جیره گاوهای شیرده تغییری در تعداد یوکاریوت ها، رومینوکوکوس آلبوس و رومینوکوکوس فلاووفیسنز تحت تأثیر اندازه قطعات ایجاد نکرد . - 7 - با وجود این فعالیت آنزیمهای تجریه کننده دیواره سلولی با کاهش اندازه قطعات جیره افزایش یافت.
نتیجهگیری کلی در جیرههای حاوی منابع فیبری غیر علوفهای همانند پوسته سویا میزان الیاف موثر فیزیکی جیره که با استفاده از الکهای جدید پنسیلوانیا حاصل میشود، شاید کاملاً بیان کننده پاسخهای فیزیولوژیک مورد انتظار نباشد. با توجه به نتایج اگرچه تأمین الیاف موثر فیزیکی با استفاده از علوفه بلند میتواند کاهش چربی شیر را جبران نماید.
