بخشی از مقاله
خلاصه
روده اکثر جانوران، از باکتریهایی به نام لاکتوباسیلها تشکیل شده است. لاکتوباسیل اسیدوفیلوس میکرو اورگانیسم های زنده ای هستندکه بااستقرار در محیط روده، مانع فعالیت میکرواورگانیسم های غیر مفید و پاتوژن می شود . - Andanil et al.2012 - باکتری های اسید لاکتیک مهمترین میکرواورگانیسم های پروبیوتیک بوده، که شامل باکتری های متنوعی مانند لاکتوباسیل اسیدوفیلوس و Bifidobacterium می باشد - مارکو و همکاران . - 2006 لاکتو باسیل ها، باسیل گرم مثبت، بدون حرکت، بدون اسپور وکاتالاز منفی هستند؛ و قند های مختلف را به لاکتات و استات تبدیل می کنند . - Guy et al. 2014 -
اکثر لاکتوباسیل ها بی خطر بوده و ممکن است آنتاگونیست باکتری های پاتوژن باشد. پروبیوتیک ها با استقرار در محیط روده می توانند تعادل میکروبی را در جهت سلامت وسودمندی آنها افزایش دهند. علاوه بر این پروبیوتیکها با سنتز برخی مواد ضروری، نقش مهمی در حفظ سلامتی فرد مصرف کننده ایفا می کنند - - Behnsen et al. 2009 - محمدیان وهمکاران، . - 1393برای شناسایی باکتری از روش مولکولی انجام شد که با استفاده از آغاز گر های طراحی شده از ژن16S rRNA برای انجام واکنش PCR ،برای تشخیص جنس های لاکتو باسیل ها، مورد استفاده قرار می گیرد - Nour , 1998 - در این تحقیق از 50ماهی نمونه برداری از روده صورت گرفت که در این به میزان 28 نمونه مثبت لاکتو فیلوس اسیدوفیلوس بعد از رنگ آمیزی و تست PCR شناسایی و جدا گردید. - لطفی و همکاران، - 1389
کلمات کلیدی: لاکتوباسیل اسیدوفیلوس، ماهی کپور نقره ای، پروبیوتیک
مقدمه
ماهی کپور نقرهای - فیتوفاک - با نام علمی - Hypophthalmichthys molitrix - این ماهی بومی چین و شرق سیبری است و برای پرورش ماهی به نقاط دیگر دنیا معرفی شده است.محل اصلی زندگی این ماهی رودخانه آمور است. ماهیان کپور نقرهای هنگامی که درجه آب 21-23 درجه سانتی گراد و رودخانه در حال سیلاب و گل آلودگی باشد به صورت دسته جمعی اقدام به تخم ریزی میکنند. در صورتی که آب ساکن باشد عمل تخم ریزی به هیچ عنوان صورت نمیگیرد، از اینرو هنگام تکثیر مصنوعی این ماهی، تنها وسیله برای القا تخم ریزی آن، تزریق هورمون هیپوفیز به این ماهی است.
تعداد تخمها 200000-1500000 عدد بوده، به قطر 0 7- 1 میلی متر میباشند. پس از 1 5 روز تخمها شکفته شده ولاروها پس از استفاده از کسیه زرده و اتمام آن از جلبک های چند میکرونی و در صد ناچیزی از پلانکتونهای جانوری تغذیه میکنند، از اینرو این ماهی به نام فیتو فاگ هم خوانده میشود . ماهیان نر کپور نقرهای در زیستگاه خوددر 4-6 سالگی و مادهها در 5-6 سالگی بالغ میشوند. تکثیر و پرورش این ماهیان به همراه ماهی علفخوار، ماهی کپور و ماهی کپور سر گنده در بیشتر کشورها از رونق چشمگیری برخوردار است. در ایران نیز پرورش این ماهی به علت تغذیه آن از پلانکتونهای گیاهی که از تولیدات طبیعی استخر هاست از اهمیت ویژهای برخوردار است. این ماهیان خواب زمستانی دارند؛ به صدا حساسند و جذب صدا میشوند و تا 1 5 متر از آب بیرون میپرند.
روش کار:
به تعداد 50 عدد از هر نمونه را به صورت مساوی انتخاب می نماییم. ونمونه ها از مراکز پرورش ماهی در نقاط مختلف جمع آوری می گردد. سپس نمونه گیری از روده ماهی انجام گرفته و در محیط کشت MRSبراث، کشت داده و در جار بی هوازی با شرایط میکروائروفیلیک قرار میدهیم و بعد از مدت زمان انکوبه، به بررسی باکتریها در صورت وجود کدورت می پردازیم که دوباره از محیط کشت رشد یافته نمونه برداشته و در محیط MRS آگار کشت می دهیم بعد از زمان انکوبه کلنی مورد نظر را برداشته و رنگ آمیزی گرم انجام می دهیم و در صورت مثبت هر منطقه از بدن جانوران دارای مجموعهای منحصر به فرد از میکروارگانیسمها است که به عنوان فلور نرمال در قسمتهای مختلف بدن مستقر هستند. که نقش مهمی در حفظ سلامتی و بهداشت فرد دارد.
عملکردهای این میکروارگانیسمها بسیار متنوع میباشد که از جمله آنها: حفظ تعادل سیستم ایمنی بدن و فعالیتهای متابولیک، کاهش خطر ابتلا به سرطان و کمک به فعالیتهای گوارشی و جلوگیری از دیابت و چاقی و.... میباشند. فلور واژن انسان شامل مجموعه میکروبی پویا و پیچیدهای است که در آن همزیستی میکروارگانیسمهای مختلف موجب حفظ سلامت فرد میشود. در مطالعات متعدد مشخص شده که لاکتوباسیلها در روده جانوران سالم وجود دارند. لاکتوباسیلها عضو اصلی باکتری های اسید لاکتیک هستند. - لطفی و همکاران، - 1389 - ایزدی و همکاران، - 1390لاکتوباسیلها مهمترین میکرواورگانیسم های پروبیوتیک بوده، که شامل باکتری های متنوعی مانند لاکتوباسیل و Bifidobacterium می باشد - مارکو و همکاران . - 2006
لاکتو باسیل ها، باسیل گرم مثبت، بدون حرکت، بدون اسپور،کاتالاز منفی، و قند های مختلف را به لاکتات و استات تبدیل می کنند . - Gatesoupe 2008 - اکثر لاکتوباسیل ها بی خطر بوده و ممکن است آنتاگونیست باکتری های پاتوژن باشد - Jean - Guy et al. 2014 - محمدیان وهمکاران، - 1393 - میر داوودی و همکاران،. - 1390مهمترین فعالیت پروبیوتیک ها در لوله گوارش ماهی از طریق بهبود جذب غذا با تولید آنزیم های خارج سلولی و ویتامین ها است. نتایج آزمایشات مختلف نشان داده شده که رشد، درصد افزایش وزن، سرعت رشد ویژه، راندمان مصرف خوراک، نسبت راندمان پروتئین و افزایش پروتئین در ماهی های تغذیه شده با پروبیوتیک بیشتر بوده است.
تاثیر مهم دیگر پروبیوتیک ها کاهش میزان بروز و شیوع بیماری ها، تقویت سیستم ایمنی و فعالیت های ضد ویروسی است. . - Behnsen et al, 2013 - تعیین توالی DNA با استفاده از پرایمر های مشخص شده و ازطریق PCR انجام می گیرد . برای شناسایی باکتری از روش مولکولی انجام می شود که با استفاده از آغاز گر های طراحی شده از ژن16S rRNA برای انجام واکنش PCR ، برای تشخیص جنس های لاکتو باسیل ها، مورد استفاده قرار می گیرد . - Nour , 1998 - همچنین ازآغاز گرهای مخصوص جنس لاکتو باسیل بعد از توالی یابی، که در بانک ژن NCBI ثبت شده می باشد؛ استفاده خواهدشد. و بعد از آن پرایمر مخصوص باکتری طراحی می گردد - . - Kwon et al.2004
